目的 探讨Toll样受体4(TLR4)抑制剂TAK-242在β淀粉样蛋白25-35片段(Aβ25-35)诱导PC12细胞毒性损伤中的保护作用及机制. 方法 利用CCK-8法检测不同浓度Aβ25-35(0、10、20、30 μmol/L)作用PC12细胞24 h后的细胞存活率,以确定构建阿尔茨海默病(AD)细胞模型的Aβ25-35浓度,同时进一步检测TAK-242预处理1h后该Aβ25-35浓度下的细胞存活率.将PC12细胞分为4组:正常对照组、Aβ处理组、TAK-242预处理组和TAK-242对照组.采用Hoechst33258染色检测各组细胞凋亡情况,采用酶联免疫反应吸附试验(ELISA)检测各组细胞培养基上清液中白介素-lβ(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平,采用Western blotting检测各组细胞TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、IκB激酶复合体(IKKα/β)和核因子-κB(NF-κB)表达水平. 结果 20 μmol/L Aβ25-35作用PC12细胞24 h后的细胞存活率约为0 mol/L Aβ25-35组的50％,因此采用此浓度Aβ25-35构建AD细胞模型;并且经TAK-242预处理后,其细胞存活率较20 μmol/L Aβ25-35组显著升高,差异有统计学意义(P＜0.05).Hoechst 33258染色显示TAK-242预处理组凋亡细胞较Aβ处理组明显减少.ELISA检测显示:与正常对照组相比,Aβ处理组IL-1β、TNF-α表达量明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05);与Aβ

作者：马成永；林永忠；王淳；王前；刘艳芝；刘莹；葛宇松

来源：中华神经医学杂志 2016 年 15卷 12期