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目的 探讨血红素结合蛋白(HPX)是否通过上调血红素氧合酶-1(HO-1)的表达,促进内皮祖细胞(EPCs)分化和新生血管形成,以修复游离血红素引起的血管内皮损伤. 方法 从大鼠骨髓提取EPCs,培养鉴定后将处于对数生长期的细胞分为5组:对照组、HPX组、血红素组、血红素+HPX组、锌原卟啉Ⅸ组.对照组以全培养基(M199培养基+10%胎牛血清+5 μg/mL碱性成纤维细胞生长因子+1%青链霉素混合液)培养,HPX组、血红素组、血红素+HPX组、锌原卟啉Ⅸ组在此基础上分别加入20 μmol/L HPX、20 μmol/L血红素、20 mol/L血红素-HPX复合物、20 μmol/L血红素-HPX复合物+10 μmol/L锌原卟啉Ⅸ.各组细胞培养24 h后采用Westem blotting检测细胞内HO-1蛋白含量;采用CD31、血管性血友病因子(vWF)免疫荧光共染检测EPCs表型及向成熟内皮细胞分化程度;采用体外血管形成实验测定EPCs成血管能力. 结果 与对照组(0.60±0.15)相比,血红素组HO-1蛋白含量(1.07±0.03)明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);与血红素组相比,血红素+HPX组HO-1蛋白含量(1.57±0.06)明显增加,差异有统计学意义(P<0.05).与对照组相比,血红素组EPCs数量减少,表面CD31、vWF表达较少,免疫荧光较弱;血红素+HPX组EPCs数量较多,表面CD31、vWF表达增加,免疫荧光较强.与对照组[(

作者:杨永妍;董贝贝;王国林;于泳浩

来源:中华神经医学杂志 2017 年 16卷 8期

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作者:
杨永妍;董贝贝;王国林;于泳浩
来源:
中华神经医学杂志 2017 年 16卷 8期
标签:
血红素结合蛋白 血红素氧合酶-1 内皮祖细胞 Hemopexin Heme oxygenase-1 Endothelial progenitor cell
目的 探讨血红素结合蛋白(HPX)是否通过上调血红素氧合酶-1(HO-1)的表达,促进内皮祖细胞(EPCs)分化和新生血管形成,以修复游离血红素引起的血管内皮损伤. 方法 从大鼠骨髓提取EPCs,培养鉴定后将处于对数生长期的细胞分为5组:对照组、HPX组、血红素组、血红素+HPX组、锌原卟啉Ⅸ组.对照组以全培养基(M199培养基+10%胎牛血清+5 μg/mL碱性成纤维细胞生长因子+1%青链霉素混合液)培养,HPX组、血红素组、血红素+HPX组、锌原卟啉Ⅸ组在此基础上分别加入20 μmol/L HPX、20 μmol/L血红素、20 mol/L血红素-HPX复合物、20 μmol/L血红素-HPX复合物+10 μmol/L锌原卟啉Ⅸ.各组细胞培养24 h后采用Westem blotting检测细胞内HO-1蛋白含量;采用CD31、血管性血友病因子(vWF)免疫荧光共染检测EPCs表型及向成熟内皮细胞分化程度;采用体外血管形成实验测定EPCs成血管能力. 结果 与对照组(0.60±0.15)相比,血红素组HO-1蛋白含量(1.07±0.03)明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);与血红素组相比,血红素+HPX组HO-1蛋白含量(1.57±0.06)明显增加,差异有统计学意义(P<0.05).与对照组相比,血红素组EPCs数量减少,表面CD31、vWF表达较少,免疫荧光较弱;血红素+HPX组EPCs数量较多,表面CD31、vWF表达增加,免疫荧光较强.与对照组[(