目的 探讨微小RNA-21对缺血缺氧所致大鼠心肌细胞凋亡的影响,并分析其可能的作用机制. 方法 (1)取大鼠心肌细胞株H9C2加入低糖无血清DMEM培养液模拟缺血环境,将细胞置于气体成分为体积分数1％氧气、5％二氧化碳和94％氮气的三气培养箱中进行缺氧培养.实时荧光定量RT-PCR检测正常心肌细胞和缺血缺氧刺激6、24 h心肌细胞中微小RNA-21的表达.(2)另取心肌细胞株H9C2按随机数字表法分为4组.正常对照组:不进行任何处理,常规培养;单纯缺血缺氧组:行单纯缺血缺氧处理24 h;阴性转染+缺血缺氧组:转染微小RNA模拟物阴性对照24 h后,给予缺血缺氧处理24 h;微小RNA-21+缺血缺氧组:转染微小RNA-21模拟物24 h后,给予缺血缺氧处理24 h.后3组均于处理完毕后立即进行如下检测,正常对照组于同时相点收集细胞进行检测.流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率;实时荧光定量RT-PCR和蛋白质印迹法分别测定心肌细胞程序性细胞死亡因子4 (PDCD4)的mRNA和蛋白表达水平.本实验样本数为6或3.对数据行单因素方差分析和LSD-t检验. 结果 (1)正常心肌细胞和缺血缺氧刺激6、24 h心肌细胞微小RNA-21的相对表达量分别为1.09 ±0.17、0.75 ±0.08、0.67 ±0.08(F=11.280,P=0.009).与正常心肌细胞比较,缺血缺氧处理24(t=4.461,P=0.004)、6 h(t=3.642,P=0.
作者：谢琼慧；赵超莉；叶子青；杨飞；阮琼芳；谢卫国
来源：中华烧伤杂志 2014 年 30卷 2期
