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目的 探讨同种异体骨髓间充质干细胞(BMSC)对LPS诱导的脓毒症大鼠腹腔巨噬细胞极化改变的影响. 方法 (1)取5只SD大鼠,采用全骨髓贴壁法分离纯化培养BMSC,取第3代细胞行形态学观察,流式细胞仪检测干细胞表面标志物CD29、CD44、CD45、CD90的表达,并进行成骨细胞、成脂肪细胞诱导分化鉴定.(2)取45只SD大鼠,按随机数字表法分为假伤组5只、LPS对照组20只、BMSC治疗组20只.对LPS对照组、BMSC治疗组大鼠予尾静脉按5 mg/kg注射LPS致脓毒症,假伤组大鼠注射等量的生理盐水模拟致伤.伤后1h,BMSC治疗组大鼠另予尾静脉注射1 mLBMSC(2×106个/mL),另2组大鼠注射等量PBS.假伤组大鼠于伤后24 h,LPS对照组、BMSC治疗组于伤后6、12、24、48 h各取5只大鼠处死后取肺组织行HE染色观察病理变化.假伤组伤后24 h的大鼠与LPS对照组、BMSC治疗组伤后24、48 h的大鼠另同时通过腹腔注射低糖DMEM培养液后取腹腔液培养巨噬细胞.流式细胞仪检测假伤组伤后24 h,LPS对照组、BMSC治疗组伤后24、48 h大鼠腹腔巨噬细胞标志物CD68(用于设门)、CD11c、CD206阳性表达情况.对数据行单因素方差分析、LSD检验. 结果 (1)分离培养的第3代贴壁细胞形态呈均一纤维样,与Fb相似;CD29、CD44、CD90呈阳性表达,CD45呈弱阳性表达;诱导后细胞可分化为成骨细胞

作者:郑远华;熊兵;邓医宇;赖文;郑少逸;卞徽宁;刘族安;黄志锋;孙传伟;李汉华;罗红敏;马亮华;陈瀚熙

来源:中华烧伤杂志 2017 年 33卷 4期

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郑远华;熊兵;邓医宇;赖文;郑少逸;卞徽宁;刘族安;黄志锋;孙传伟;李汉华;罗红敏;马亮华;陈瀚熙
来源:
中华烧伤杂志 2017 年 33卷 4期
标签:
脓毒症 巨噬细胞 骨髓间充质干细胞 Sepsis Macrophages Bone marrow mesenchymal stem cells
目的 探讨同种异体骨髓间充质干细胞(BMSC)对LPS诱导的脓毒症大鼠腹腔巨噬细胞极化改变的影响. 方法 (1)取5只SD大鼠,采用全骨髓贴壁法分离纯化培养BMSC,取第3代细胞行形态学观察,流式细胞仪检测干细胞表面标志物CD29、CD44、CD45、CD90的表达,并进行成骨细胞、成脂肪细胞诱导分化鉴定.(2)取45只SD大鼠,按随机数字表法分为假伤组5只、LPS对照组20只、BMSC治疗组20只.对LPS对照组、BMSC治疗组大鼠予尾静脉按5 mg/kg注射LPS致脓毒症,假伤组大鼠注射等量的生理盐水模拟致伤.伤后1h,BMSC治疗组大鼠另予尾静脉注射1 mLBMSC(2×106个/mL),另2组大鼠注射等量PBS.假伤组大鼠于伤后24 h,LPS对照组、BMSC治疗组于伤后6、12、24、48 h各取5只大鼠处死后取肺组织行HE染色观察病理变化.假伤组伤后24 h的大鼠与LPS对照组、BMSC治疗组伤后24、48 h的大鼠另同时通过腹腔注射低糖DMEM培养液后取腹腔液培养巨噬细胞.流式细胞仪检测假伤组伤后24 h,LPS对照组、BMSC治疗组伤后24、48 h大鼠腹腔巨噬细胞标志物CD68(用于设门)、CD11c、CD206阳性表达情况.对数据行单因素方差分析、LSD检验. 结果 (1)分离培养的第3代贴壁细胞形态呈均一纤维样,与Fb相似;CD29、CD44、CD90呈阳性表达,CD45呈弱阳性表达;诱导后细胞可分化为成骨细胞