目的 探讨变性Ⅰ型胶原在人成纤维细胞(Fb)向肌Fb分化中的作用. 方法 取烧伤瘢痕手术患者捐献的少量正常皮肤,组织块培养法获得人Fb,并进行传代培养,取第4代细胞进行以下实验.(1)取Fb,按随机数字表法分为正常胶原组和变性胶原组,每组10孔.正常胶原组Fb接种于正常Ⅰ型胶原包被的盖玻片,变性胶原组Fb接种于变性Ⅰ型胶原包被的盖玻片.免疫组织化学法检测增殖细胞核抗原(PCNA)表达,计算PCNA表达阳性细胞百分比.(2)另取Fb,同(1)进行分组处理,每组12孔,噻唑蓝比色法检测细胞增殖活性.(3)另取Fb,同(1)进行分组处理,罗丹明-鬼笔环肽染色观察细胞微丝形态.(4)另取Fb,同(1)进行分组处理,免疫组织化学法检测细胞中α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,免疫荧光法检测细胞中OB钙黏蛋白表达.(5)另取Fb,按随机数字表法分为正常胶原组、变性胶原组和普通玻片组,每组6孔.正常胶原组和变性胶原组Fb处理同(1),普通玻片组Fb接种于无胶原包被的盖玻片.蛋白质印迹法检测细胞中α-SMA和OB钙黏蛋白表达.(6)另取Fb,同(5)进行分组处理,实时荧光定量反转录-聚合酶链反应法检测细胞中Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原及α-SMA的mRNA表达.对数据行t检验、单因素方差分析、LSD检验. 结果 (1)变性胶原组PCNA表达阳性细胞百分比为(83±9)％,明显高于正常胶原
作者：王志勇；王西樵；刘英开；原博；董叫云；宋菲；姜育智；陆树良
来源：中华烧伤杂志 2018 年 34卷 2期
