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目的研究干扰素-α(IFN-α)抗乙型肝炎病毒(HBV)的信号转导机制.方法用定量聚合酶链反应(PCR)检测IFNα-2b处理前、后的HepG2.2.15细胞上清的乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA)水平.半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测IFNα-2b处理后不同时点的HepG2.2.15细胞和其母源细胞HepG2细胞内信号转导和转录活化因子1(STAT1)、STAT2、干扰素刺激基因因子3γ(ISGF3γ)、2'5'-寡腺苷酸合成酶(2'5'-OAS)、RAN依赖蛋白激酶(PKR)的mRNA表达水平.WesternBlot检测ISGF3γ的蛋白质表达水平.并用染料木黄酮阻断IFNα-2b信号转导后再次检测上述指标.结果IFNα-2b处理8 h后,HepG2.2.15细胞上清HBV DNA平均减少0.72log 10 copies/ml,而加染料木黄酮后则无减少.IFNα-2b处理后,Hep G2和HepG2.2.15细胞中STAT1、STAT2、ISGF3γ、2'5'-OAS和PKR mRNA水平明显升高;加染料木黄酮后前3个因子mRNA水平仍然能检测到,而2'5'-OAS和PKRmRNA则受到抑制.Western Blot检测也提示IFNα-2b处理后ISGF3γ蛋白质水平升高,加染料木黄酮后其表达受到抑制.结论Janus酪氨酸激酶(JAK)-STAT途径在IFN-α抗HBV中发挥主要作用,而ISGF3是该途径的一个重要因子.

作者:张权;魏来;王燕

来源:中华实验和临床病毒学杂志 2005 年 19卷 2期

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作者:
张权;魏来;王燕
来源:
中华实验和临床病毒学杂志 2005 年 19卷 2期
标签:
肝炎病毒,乙型 干扰素-α 信号转导 转录因子 Janus酪氨酸激酶
目的研究干扰素-α(IFN-α)抗乙型肝炎病毒(HBV)的信号转导机制.方法用定量聚合酶链反应(PCR)检测IFNα-2b处理前、后的HepG2.2.15细胞上清的乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA)水平.半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测IFNα-2b处理后不同时点的HepG2.2.15细胞和其母源细胞HepG2细胞内信号转导和转录活化因子1(STAT1)、STAT2、干扰素刺激基因因子3γ(ISGF3γ)、2'5'-寡腺苷酸合成酶(2'5'-OAS)、RAN依赖蛋白激酶(PKR)的mRNA表达水平.WesternBlot检测ISGF3γ的蛋白质表达水平.并用染料木黄酮阻断IFNα-2b信号转导后再次检测上述指标.结果IFNα-2b处理8 h后,HepG2.2.15细胞上清HBV DNA平均减少0.72log 10 copies/ml,而加染料木黄酮后则无减少.IFNα-2b处理后,Hep G2和HepG2.2.15细胞中STAT1、STAT2、ISGF3γ、2'5'-OAS和PKR mRNA水平明显升高;加染料木黄酮后前3个因子mRNA水平仍然能检测到,而2'5'-OAS和PKRmRNA则受到抑制.Western Blot检测也提示IFNα-2b处理后ISGF3γ蛋白质水平升高,加染料木黄酮后其表达受到抑制.结论Janus酪氨酸激酶(JAK)-STAT途径在IFN-α抗HBV中发挥主要作用,而ISGF3是该途径的一个重要因子.