目的 构建人乳头瘤病毒11型L2E7原核表达系统pET9aHPV11L2E7,并纯化蛋白进行小鼠免疫效果研究.方法 从尖锐湿疣组织中扩增人乳头瘤病毒11型L2、E7基因片段,构建pET9aHPV11L2E7原核表达重组质粒并测序,在大肠埃希菌宿主菌BL21(DE3+)中经IPTG诱导表达融合蛋白L2E7(553个氨基酸),经SDS-PAGE电泳和Western Blot进行鉴定.CM离子交换介质纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,进行细胞免疫水平和体液免疫水平的检测.结果 成功构建了pET9aHPV11L2E7原核表达系统,纯化获得的HPV11 L2E7蛋白免疫BALB/c小鼠后能检测到针对HPV11E7特异性的细胞免疫,血清中能检测到高效价抗HPV11 L2E7抗体.结论 纯化的HPV11L2E7融合蛋白能够引发特异性细胞和体液免疫反应,能作为尖锐湿疣免疫治疗候选疫苗.
作者:张卉;赵莉;任皎;高见;边涛;范江涛;阮力;陈心秋;田厚文
来源:中华实验和临床病毒学杂志 2007 年 21卷 2期