目的 利用毕赤酵母系统表达HPV16 L1-HCMV UL138含多个B细胞表位片段的嵌合病毒样颗粒,并评价其免疫效应.方法 选择富含B细胞表位的HCMV UL13896-138片段,构建毕赤酵母真核表达质粒pPIC3.5K/HPV16L1/UL13896-138.线性化后的重组质粒电转化GS115毕赤酵母,甲醇诱导HPV16 L1/UL13896-138蛋白表达,采用肝素亲和层析法纯化嵌合VLPs,并加以鉴定.将纯化的嵌合VLPs免疫BALB/c小鼠,通过ELISA检测免疫小鼠血清的UL138特异性抗体水平.结果 经PCR、酶切和测序分析表明成功构建了pPIC3.5K/HPV16 L1/UL13896-138嵌合重组质粒.经甲醇诱导后,SDS-PAGE和Western Blot证实重组酵母菌裂解产物存在目的蛋白.肝素亲和纯化后,透射电镜观察到了直径大约55nm的病毒样颗粒.免疫小鼠血清的ELISA结果显示,HPV16 L1-HCMV UL138B细胞表位嵌合病毒样颗粒能诱导小鼠产生较高水平的UL138特异性IgG抗体.结论 以HPV16 L1为载体,利用整合型重组毕赤酵母表达系统成功制备了HCMV UL138含多个B表位片段的嵌合病毒样颗粒,免疫小鼠可产生较高水平的体液免疫反应.
作者：李宝青；田晓娟；陈晓晴；王红；陶洪群；郑育；沈贤；李文姝；张丽芳
来源：中华实验和临床病毒学杂志 2015 年 29卷 6期
