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目的 建立一种基于高通量测序技术的发热伴血小板减少综合征病毒(svvere fvver with thrombocytopenia syndrome virus,SFTS)基因组的测序方法.方法 提取SFTS病毒核酸,分别采用随机引物和oligo (dT)磁珠特异性抓取核酸的方法,优化扩增和纯化条件并建库,利用二代测序仪检测病毒核酸序列.结果 3株病毒采用两种方法测序结果差距较大,利用随机引物建库法获得的数据测序深度和覆盖度明显低于oligo(dT)磁珠抓取建库法.采用oligo(dT)磁珠抓取建库的方法,可对提取的核酸大于300ng的毒株进行测序,3株病毒测序深度都在900以上,覆盖度均超过99%,与NCBI上数据匹配度在90%以上.结论 利用oligo(dT)磁珠抓取SFTS病毒核酸的方法 进行建库,建立了基于二代测序平台的SFTS病毒基因组检测方法.

作者:俞维维;孙逸;颜浩;姚文武;楼秀玉;茅海燕;张严峻

来源:中华实验和临床病毒学杂志 2019 年 33卷 1期

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作者:
俞维维;孙逸;颜浩;姚文武;楼秀玉;茅海燕;张严峻
来源:
中华实验和临床病毒学杂志 2019 年 33卷 1期
标签:
发热伴血小板减少综合征病毒 文库构建 高通量测序 基因组 Severe fever with thrombocytopenia syndrome virus Library construction Next-generation sequencing Genome
目的 建立一种基于高通量测序技术的发热伴血小板减少综合征病毒(svvere fvver with thrombocytopenia syndrome virus,SFTS)基因组的测序方法.方法 提取SFTS病毒核酸,分别采用随机引物和oligo (dT)磁珠特异性抓取核酸的方法,优化扩增和纯化条件并建库,利用二代测序仪检测病毒核酸序列.结果 3株病毒采用两种方法测序结果差距较大,利用随机引物建库法获得的数据测序深度和覆盖度明显低于oligo(dT)磁珠抓取建库法.采用oligo(dT)磁珠抓取建库的方法,可对提取的核酸大于300ng的毒株进行测序,3株病毒测序深度都在900以上,覆盖度均超过99%,与NCBI上数据匹配度在90%以上.结论 利用oligo(dT)磁珠抓取SFTS病毒核酸的方法 进行建库,建立了基于二代测序平台的SFTS病毒基因组检测方法.