目的观察人肠上皮细胞对内毒素刺激的反应性,探讨其耐受内毒素的分子机制.方法分别用凝胶迁移阻滞法(EMSA)和酶联免疫吸附分析(ELISA)法检测系列浓度的内毒素刺激人小肠上皮细胞株hIC)1h后细胞核转录因子(NF-κB)的活性变化和刺激18h后细胞白细胞介素-8(IL-8)的分泌水平.用核糖核酸酶保护法(RPA)检hIC内毒素相关受体--Toll样受体4(TLR4)、CD14和MD-2 mRNA的表达.将转入TLR4、CD14和MD-2表达质粒hIC经内毒素刺激后,检测细胞NF-κB和IL-8水平的变化.结果用系列浓度的内毒素刺hIC后,均检测不到NF-κB的活性和IL-8的分泌hIC不表达TLR4、CD14和MD-2 mRNA;转染TLR4、CD14和MD-2质粒hIC受脂多糖(LPS)刺激后,可检测到较强的NF-κB活性和明显的IL-8分泌 (217.33± 33.21)ng/L.结论hIC呈内毒素无反应性,其表面内毒素相关受体TLR4、CD14和MD-2不表达是其耐受内毒素作用的重要分子机制.
作者：张道杰；蒋建新；陈永华；朱佩芳
来源：中华实验外科杂志 2004 年 21卷 11期
