目的探讨野生型/突变型RASSF1A基因的表达对人肝癌细胞株QGY-7703在体内外生长的影响.方法构建突变型RASSF1A基因的真核表达载体,通过脂质体介导的基因转染法将野生型/突变型RASSF1A基因的真核表达载体及空载体转染肝癌细胞株QGY-7703,G418筛选稳定表达株,并以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot进行鉴定.通过细胞生长曲线、软琼脂集落形成试验和裸鼠致瘤性试验对各稳定表达株的生物学行为进行检测.结果成功建立稳定表达野生型和突变型RASSF1A基因的肝癌细胞株.以转染空载体的QGY-7703细胞为对照,野生型RASSF1A基因的表达可明显抑制肝癌细胞在体外的生长,显著降低肝癌细胞在软琼脂中形成的克隆数目(P<0.01)和大小,显著减慢裸鼠皮下瘤的生长速度和重量(P<0.01).突变型RASSF1A基因的表达对肝癌细胞的生长影响不大.结论野生型RASSF1A的重表达有助于QGY-7703恶性表型的逆转;野生型RASSF1A基因是一个肝癌相关的抑癌基因.
作者:薛万江;钱海鑫;管洪庚;周晓俊;秦磊;余水长
来源:中华实验外科杂志 2004 年 21卷 12期