目的 观察联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因真核表达载体对人胆管癌细胞QBC-939生长的影响,初步探讨DNMT1、DNMT3b基因在胆管癌发生中的作用.方法 分别构建反义DNMT1基因和反义DNMT3b基因真核表达载体,脂质体介导法将两者联合转入人胆管癌细胞QBC-939,Western blot检测转染前后相应蛋白的表达变化,噻唑蓝(MTT)比色法观察各组细胞生长曲线,流式细胞术观察细胞生长周期及凋亡率的变化,裸鼠皮下种植细胞观察成瘤大小.结果 (1)Western blot检测证实转染反义基因能使相应蛋白表达水平降低;(2)联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因和单独转染反义DNMT1能影响QBC-939的生长曲线,使细胞增殖减慢,其中以前者为甚;(3)联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因和单独转染反义DNMT1能影响QBC-939的细胞周期,使之阻滞于G1期,使细胞凋亡率从(1.63±0.27)
作者:左石;罗剑;刘民锋;徐立宁;董泾青;郭伟;邹声泉
来源:中华实验外科杂志 2006 年 23卷 8期