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目的 探讨结肠癌LS174T细胞及结直肠腺癌组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达及与NDRG1的相关性.方法 构建靶向HIF-1α的质粒pSilence-2.1-U6-siRNA并鉴定,采用阳离子脂质体转染法将其转染LS174T细胞,低氧培养24 h,运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测HIF-1α、NDRG1 mRNA表达.Western blots检测NDRG1蛋白表达.采用原位杂交技术检测人结直肠腺瘤和腺癌组织中HIF-1α mRNA,应用免疫组织化学方法检测NDRG1蛋白的表达.结果 siRNA从转录水平抑制了HIF-1α基因表达.同时,NDRG1 mRNA、蛋白表达也显著受抑制.结直肠腺癌组织中HIF-1α mRNA阳性表达率为67.7

作者:江从庆;刘志苏;赵端仪;钱群;邬开朗;吴建国

来源:中华实验外科杂志 2007 年 24卷 8期

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作者:
江从庆;刘志苏;赵端仪;钱群;邬开朗;吴建国
来源:
中华实验外科杂志 2007 年 24卷 8期
标签:
缺氧诱导因子-1α N-myc下游调节基因1 小干扰RNA 结直肠癌
目的 探讨结肠癌LS174T细胞及结直肠腺癌组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达及与NDRG1的相关性.方法 构建靶向HIF-1α的质粒pSilence-2.1-U6-siRNA并鉴定,采用阳离子脂质体转染法将其转染LS174T细胞,低氧培养24 h,运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测HIF-1α、NDRG1 mRNA表达.Western blots检测NDRG1蛋白表达.采用原位杂交技术检测人结直肠腺瘤和腺癌组织中HIF-1α mRNA,应用免疫组织化学方法检测NDRG1蛋白的表达.结果 siRNA从转录水平抑制了HIF-1α基因表达.同时,NDRG1 mRNA、蛋白表达也显著受抑制.结直肠腺癌组织中HIF-1α mRNA阳性表达率为67.7