目的 探讨人食管鳞癌细胞系Eca-109中RNA干扰抑制缺氧诱导因子(HIF)-1α的体内、外实验效果.方法 用针对HIF-1α mRNA的小发夹RNA(shRNA)真核表达载体转染人食管鳞癌细胞Eca-109,检测HIF-1α、基质金属蛋白酶(MMP)-2、葡萄糖载体蛋白(GLUT)-1表达,挑选干扰效果最好的细胞命名为Eca-109/shRNA,流式细胞仪检测细胞凋亡率.6周龄BALB/C裸鼠30只,按皮下注入细胞不同均分为三组,A组为Eca-109,B组为转染空质粒Eca-109(Eca-109/Neo),C组为Eca-109/shRNA.观察肿瘤出现时间,测量裸鼠体质量、瘤体大小,计算肿瘤体积.28 d后处死全部裸鼠,取瘤体称重.用Western印迹法检测肿瘤组织HIF-1α蛋白、血管内皮生长因子(VEGF)、凋亡抑制蛋白bcl-2和生存素的表达.结果 Eca-109/shRNA细胞的HIF-1α蛋白表达明显被抑制,同时MMP-2,GLUT-1表达也明显下调,细胞凋亡率为(21.32±1.12)
作者:张捷;施瑞华;肖斌;张国新;郝波
来源:中华消化杂志 2008 年 28卷 1期