目的 探讨沉默缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factor-1 alpha,HIF-1α)对缺氧状态人胶质瘤SHG44细胞糖酵解及细胞增殖的影响及机制.方法 用氯化钴( CoC12)模拟缺氧,并应用小分子RNA干扰(siRNA)技术沉默HIF-1 α基因表达.将细胞分成4组:正常培养组、缺氧培养组、阴性对照组和siRNA干扰组.各组又分为常糖组(2g/L)和高糖组(5g/L).Real-time PCR、Western blot法分别检测肿瘤细胞HIF-1α和糖酵解酶的mRNA及蛋白表达；生物发光法检测细胞内ATP水平；激光共聚焦显微镜检测细胞线粒体膜电位；MTT法检测细胞增殖；流式细胞技术检测细胞凋亡、坏死及细胞内活性氧的变化.结果 ①缺氧条件下,HIF-1α siRNA干扰沉默HIF-1α基因的效率达到71％.②缺氧培养组HIF-1α和糖酵解酶的mRNA和蛋白表达高于正常培养组(P＜0.05),细胞内ATP水平减少、细胞坏死和凋亡均增加,而细胞增殖能力明显增强(P＜0.05),同时线粒体膜电位升高(P＜0.05).③siRNA干扰组HIF-1 α和糖酵解酶的表达量低于缺氧培养组、阴性对照组(P＜0.05)；ATP水平低于缺氧培养组,细胞增殖率下降(P＜0.05),细胞坏死率高于缺氧培养组(P＜0.05),线粒体膜电位恢复.结论 缺氧诱使肿瘤细胞表达HIF-1α,促进肿瘤恶性进展；siRNA干扰沉默HIF-1α能加重缺氧状态下SHG44细
作者：徐高峰；王茂德；谢万福；姜海涛；李瑞春
来源：第三军医大学学报 2011 年 33卷 20期
