目的 观察培养的PC12细胞中多巴胺D2受体(DA D2R)蛋白的表达,胰岛素对百草枯(paraquat,PQ)诱导的PC12细胞形态学、生存率和DA含量的影响.方法 应用免疫沉淀Western印迹分析技术对培养的PC12细胞中DA D2R表达的检测;应用二甲基噻唑二苯基四唑溴盐(MTT)法,观察PC12细胞暴露于不同浓度PQ组和胰岛素预先干预后再暴露于PQ组后细胞形态学和生存率的改变;应用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测空白对照PC12细胞组、PQ干预组、胰岛素组和胰岛素加PQ组PC12细胞上清液DA的浓度.结果 (1)Western法检测到培养的PC12细胞中有DA D2R蛋白的表达;(2)空白对照组PC12细胞形态胞体呈梭形,细胞突触完整;PC12细胞暴露T600 μmol/L PQ组24h,多数细胞胞体变圆、空泡变性、突触变短或消失.预加100 nmol/L胰岛素预处理20 min后、再暴露于600 μmol/L PQ组24 h,与空白对照组比较细胞形态略有改变,细胞形态呈梭形或不规则但非圆形,细胞突触又有生长;(3)PC12细胞生存率与PQ干预的浓度呈反向变化趋势;而胰岛素可以减少600 μmol/L PQ 24 h内对PC12细胞生存率的毒性损伤;(4)胰岛素可在一定程度上提高正常PC12细胞和600μmol/L PQ干预的PC12细胞上清液中的DA浓度,但差异无统计学意义(P>0.05).结论 胰岛素对PQ损害的PC12多巴胺能神经元细胞
作者:杨新玲;邬剑军;蒋雨平;张晨
来源:中华实验外科杂志 2009 年 26卷 7期