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目的 探讨促肝细胞再生磷酸酶-1(PRL-1)基因对肺癌细胞侵袭的影响及其机制.方法 应用PRL-1基因小干扰RNA(siRNA)转染处理肺癌细胞株A549后,分别采用实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测PRL-1基因和基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-7和MMP-9 mRNA和蛋白水平,分别采用软琼脂集落培养实验和Boyden小室模型实验检测癌细胞的锚着不依赖性增殖和侵袭能力.结果 siRNA转染组PRL-1 mRNA和蛋白水平明显下调,且呈浓度和时间依赖性(P<0.01).软琼脂集落形成实验显示,3.125、6.25和12.5 nmol/L siRNA组集落形成数分别为17.8±1.6、13.6±1.5、8.8±1.4,而对照组为22.6±1.8(P<0.05);Boyden小室模型实验显示,3.125、6.25和12.5 nmol/L siRNA组穿过滤膜的细胞分别为33.6±2.1、19.5±1.9、8.1±1.8,而对照组为49.4±2.3(P<0.05).同时发现,转染组细胞MMP-2、MMP-7、MMP-9基因mRNA和蛋白水平明显下调.结论 PRL-1 siRNA转染可抑制肺癌细胞侵袭,其机制可能与下调MMP-2、MMP-7、MMP-9表达有关.

作者:詹洪峰;周永静;范钰

来源:中华实验外科杂志 2010 年 27卷 8期

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作者:
詹洪峰;周永静;范钰
来源:
中华实验外科杂志 2010 年 27卷 8期
标签:
肺肿瘤 侵袭 基质金属蛋白酶 Lung carcinoma Invasion Matrix metalloproteinase
目的 探讨促肝细胞再生磷酸酶-1(PRL-1)基因对肺癌细胞侵袭的影响及其机制.方法 应用PRL-1基因小干扰RNA(siRNA)转染处理肺癌细胞株A549后,分别采用实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测PRL-1基因和基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-7和MMP-9 mRNA和蛋白水平,分别采用软琼脂集落培养实验和Boyden小室模型实验检测癌细胞的锚着不依赖性增殖和侵袭能力.结果 siRNA转染组PRL-1 mRNA和蛋白水平明显下调,且呈浓度和时间依赖性(P<0.01).软琼脂集落形成实验显示,3.125、6.25和12.5 nmol/L siRNA组集落形成数分别为17.8±1.6、13.6±1.5、8.8±1.4,而对照组为22.6±1.8(P<0.05);Boyden小室模型实验显示,3.125、6.25和12.5 nmol/L siRNA组穿过滤膜的细胞分别为33.6±2.1、19.5±1.9、8.1±1.8,而对照组为49.4±2.3(P<0.05).同时发现,转染组细胞MMP-2、MMP-7、MMP-9基因mRNA和蛋白水平明显下调.结论 PRL-1 siRNA转染可抑制肺癌细胞侵袭,其机制可能与下调MMP-2、MMP-7、MMP-9表达有关.