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目的 观察膜孔相互作用分子1(Stim1)基因表达下调对肝细胞癌(HCC)细胞凋亡的作用.方法 设计和合成Stim1基因干扰序列,构建慢病毒介导的RNA干扰载体,利用第3代慢病毒包装系统进行病毒制备;干扰慢病毒以2倍感染复数( MOI)感染SMMC7721细胞,定量聚合酶链反应(PCR)和免疫印迹法(WB)检测Stim1基因表达;采用碘化丙锭(PI)和膜联蛋白V( Annexin V)双染法检测SMMC7721细胞的凋亡变化. 结果 测序结果表明干扰序列连入干扰载体;定量PCR和West-em blot法检测结果显示干扰慢病毒感染可以抑制Stim1基因75%以上的表达;流式细胞仪检测结果表明在Stim1基因被敲减后,凋亡细胞的比例从8%上升到26%.结论Stim1基因的敲减促进SMMC7721细胞的凋亡.

作者:王弼;陈燕凌;张吉成;蔡欣然

来源:中华实验外科杂志 2012 年 29卷 7期

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作者:
王弼;陈燕凌;张吉成;蔡欣然
来源:
中华实验外科杂志 2012 年 29卷 7期
标签:
癌,肝细胞 膜孔相互作用分子1 RNA干扰 脱噬作用 Carcinoma,hepatoeellular Stromal interaction molecular 1 RNA interference Apoptosis
目的 观察膜孔相互作用分子1(Stim1)基因表达下调对肝细胞癌(HCC)细胞凋亡的作用.方法 设计和合成Stim1基因干扰序列,构建慢病毒介导的RNA干扰载体,利用第3代慢病毒包装系统进行病毒制备;干扰慢病毒以2倍感染复数( MOI)感染SMMC7721细胞,定量聚合酶链反应(PCR)和免疫印迹法(WB)检测Stim1基因表达;采用碘化丙锭(PI)和膜联蛋白V( Annexin V)双染法检测SMMC7721细胞的凋亡变化. 结果 测序结果表明干扰序列连入干扰载体;定量PCR和West-em blot法检测结果显示干扰慢病毒感染可以抑制Stim1基因75%以上的表达;流式细胞仪检测结果表明在Stim1基因被敲减后,凋亡细胞的比例从8%上升到26%.结论Stim1基因的敲减促进SMMC7721细胞的凋亡.