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目的 建立成人主动脉血管平滑肌细胞体外培养的有效方法.方法 无菌条件下分离成人主动脉的平滑肌层,剪成1 mm3的碎片,0.1% Ⅰ型胶原酶预处理1h,组织块贴壁法,以含胎牛血清20%的DMEM低糖培养基培养.倒置显微镜观察培养细胞的形态学特点,免疫荧光法检测平滑肌细胞肌动蛋白(α-SMA)的表达.结果 培养至4~5d组织块边缘即有少量细胞爬出,呈长梭形,胞质丰富;培养至1~2周组织块边缘细胞融合,呈典型的“峰谷”样表现.免疫荧光染色结果显示胞质内α-SMA的表达丰富,荧光强度在(++)~ (+++).结论 胶原酶预处理组织的改良组织块贴壁法培养人主动脉血管平滑肌细胞是一种可行有效的实验方法.

作者:陆树洋;孙晓宁;洪涛;宋凯;杨守国;王春生

来源:中华实验外科杂志 2012 年 29卷 11期

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作者:
陆树洋;孙晓宁;洪涛;宋凯;杨守国;王春生
来源:
中华实验外科杂志 2012 年 29卷 11期
标签:
主动脉 血管平滑肌细胞 培养 Aorta Vascular smooth muscle cells Cell culture
目的 建立成人主动脉血管平滑肌细胞体外培养的有效方法.方法 无菌条件下分离成人主动脉的平滑肌层,剪成1 mm3的碎片,0.1% Ⅰ型胶原酶预处理1h,组织块贴壁法,以含胎牛血清20%的DMEM低糖培养基培养.倒置显微镜观察培养细胞的形态学特点,免疫荧光法检测平滑肌细胞肌动蛋白(α-SMA)的表达.结果 培养至4~5d组织块边缘即有少量细胞爬出,呈长梭形,胞质丰富;培养至1~2周组织块边缘细胞融合,呈典型的“峰谷”样表现.免疫荧光染色结果显示胞质内α-SMA的表达丰富,荧光强度在(++)~ (+++).结论 胶原酶预处理组织的改良组织块贴壁法培养人主动脉血管平滑肌细胞是一种可行有效的实验方法.