目的 探讨沉默乙型肝炎病毒编码X蛋白(HBx)基因后对索拉非尼促人肝癌细胞株PLC凋亡的影响及其机制.方法 应用小干扰RNA(siRNA)方法沉默HBx基因,应用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测HBx mRNA表达水平,流式细胞技术检测细胞凋亡,Real-time PCR基因芯片检测HBx-siRNA转染后索拉非尼作用肝癌敏感细胞株PLC丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路基因的表达.结果 HBx特异的siRNA作用后,HBx mRNA表达水平为0.61,与其他对照组比较显著下调(P<0.05).索拉非尼作用HBx-siRNA干扰后PLC细胞株凋亡表达率为43%,显著高于其他对照组(P<0.05).索拉非尼作用PLC细胞后,与对照组比较,实验组MAPK信号通路中有13个差异表达基因,其中>2.0倍的有2个,≤0.5倍的有11个.用siRNA干扰去除HBx基因的影响,经索拉非尼作用PLC细胞后,与对照组比较,实验组MAPK信号通路中有37个差异表达基因,其中>2.0倍的有1个,≤0.5倍的36个.结论 沉默HBx基因增强了索拉非尼促人肝癌细胞株PLC的凋亡作用,可能是沉默HBx基因表达后,扩大和增强了索拉非尼对MAPK信号通路基因的抑制作用.
作者:陈东;赵鹏;肖伟锴;李绍强;殷晓煜;梁力建
来源:中华实验外科杂志 2013 年 30卷 10期