目的 观察微小RNA-135a(miRNA-135a)对人胰腺癌细胞株Bxpc-3增殖及凋亡的影响.方法 噻唑蓝(MTT)实验检测5-氟尿嘧啶(5-Fu)对Bxpc-3细胞的抑制率,选择合适的5-Fu浓度进行后续实验;流式细胞术检测5-Fu作用后Bxpc-3细胞的凋亡率;实时定量荧光逆转录聚合酶链反应(FQ-PCR)检测5 Fu作用后Bxpc-3细胞miRNA-135a的含量变化.设计miRNA-135a模拟物及反义寡核苷酸链,分别转染Bxpc-3细胞,并转染空病毒组作为对照,RT-qPCR检测各转染组miRNA-135a表达量;MTT法实验检测转染后各组Bxpc-3细胞的增殖率;流式细胞术检测5-Fu作用后各转染组Bxpc-3细胞的凋亡率.结果 5-Fu对胰腺癌细胞Bxpc-3的抑制有浓度和时间依赖性,随着药物浓度增大及作用时间延长,5-Fu对Bxpc-3抑制率增高.经5-Fu处理3、6、12h后miRNA-135a表达量是对照组的(0.45±0.02)、(0.60±0.03)、(0.73±0.02)倍,差异均有统计学意义(P<0.05).转染miRNA-135a模拟物组较空病毒miRNA-135a表达量升高(9.73±0.83)倍,差异有统计学意义(P<0.05);转染miRNA-135a反义寡核苷酸链组是空病毒组miRNA-135a表达量的(0.26±0.01)倍,差异有统计学意义(P<0.05).转染miRNA-135a模拟物组较转染空病毒组细胞增殖率明显升高,相反转染miRNA135反义寡核苷酸链组较转染空病毒组细胞增
作者:秦涛;付强;刘传江;胡明星;唐强;王玉柱;薛飞;张莉;张宏伟
来源:中华实验外科杂志 2014 年 31卷 1期