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目的 观察沉默精子相关抗原9基因(SPAG9)对裸鼠前列腺癌PC-3细胞移植瘤的抑制作用.方法 利用LipofectamineTM 2000将pGPU6/绿色荧光蛋白(GFP)/Neo-SPAG9、pGPU6/GFP/Neo转染至人前列腺癌PC-3细胞.取浓度为2×1010/L分别转染pGPU6/GFP/Neo-SPAG9和pGPU6/GFP/Neo的PC-3和PC-3细胞悬液0.2ml分别注射至各组裸鼠左腋皮下,建立前列腺癌DU-145荷瘤鼠模型,共3组,每组6只.每隔4d测量皮下移植瘤体积,绘制瘤体生长曲线.苏木素-伊红(HE)染色观察肿瘤生长.原位缺口末端标记法(TUNEL)检测移植瘤凋亡.免疫组织化学法检测各组瘤体E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶(MMP)-2和血管内皮生长因子(VEGF)表达.结果 第27天时处死裸鼠后,转染pGPU6/GFP/Neo-SPAG9组移植瘤体积为(397.9±53.1)mm3,显著小于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);HE染色表明:pGPU6/GFP/Neo-SPAG9组的PC-3细胞生长抑制.TUNEL结果显示,转染pGPU6/GFP/Neo-SPAG9组平均凋亡率为(67.6±6.2)%,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);免疫组织化学法显示,Vimentin、MMP-2、E-cadherin在转染pGPU6/GFP/Neo-SPAG9组的平均值分别为75.87±6.89、74.97 ±8.12、306.13±21.87,与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).pGPU6/GFP/Neo

作者:刘宁;毛立军;曹航;李望;温儒民;陈家存

来源:中华实验外科杂志 2016 年 33卷 1期

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作者:
刘宁;毛立军;曹航;李望;温儒民;陈家存
来源:
中华实验外科杂志 2016 年 33卷 1期
标签:
精子相关抗原9 前列腺癌 Silencing sperm associated antigen 9 Prostate cancer
目的 观察沉默精子相关抗原9基因(SPAG9)对裸鼠前列腺癌PC-3细胞移植瘤的抑制作用.方法 利用LipofectamineTM 2000将pGPU6/绿色荧光蛋白(GFP)/Neo-SPAG9、pGPU6/GFP/Neo转染至人前列腺癌PC-3细胞.取浓度为2×1010/L分别转染pGPU6/GFP/Neo-SPAG9和pGPU6/GFP/Neo的PC-3和PC-3细胞悬液0.2ml分别注射至各组裸鼠左腋皮下,建立前列腺癌DU-145荷瘤鼠模型,共3组,每组6只.每隔4d测量皮下移植瘤体积,绘制瘤体生长曲线.苏木素-伊红(HE)染色观察肿瘤生长.原位缺口末端标记法(TUNEL)检测移植瘤凋亡.免疫组织化学法检测各组瘤体E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶(MMP)-2和血管内皮生长因子(VEGF)表达.结果 第27天时处死裸鼠后,转染pGPU6/GFP/Neo-SPAG9组移植瘤体积为(397.9±53.1)mm3,显著小于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);HE染色表明:pGPU6/GFP/Neo-SPAG9组的PC-3细胞生长抑制.TUNEL结果显示,转染pGPU6/GFP/Neo-SPAG9组平均凋亡率为(67.6±6.2)%,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);免疫组织化学法显示,Vimentin、MMP-2、E-cadherin在转染pGPU6/GFP/Neo-SPAG9组的平均值分别为75.87±6.89、74.97 ±8.12、306.13±21.87,与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).pGPU6/GFP/Neo