目的 观察外源性信号素3A (SEMA3A)对转化生长因子-β1(TGF-β1)介导的肺癌A549细胞发生上皮-间充质转化(EMT)的调节作用.方法 常规培养肺癌A549细胞并分为3组:对照组、TGF-β1诱导组、SEMA3A干预组,观察细胞形态,采用划痕实验检测细胞迁移能力,免疫细胞化学染色检测波形蛋白(Vimentin)的表达,Western blot法检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)和Vimentin的蛋白表达水平.结果 予以5 μg/L TGF-β1诱导48h后,可见A549细胞由原有的铺路石样,转化成纺锤体形或长梭形,细胞间连接消失,细胞间隔变大,呈离散状态.划痕实验结果显示,TGF-β1能够显著促进A549细胞迁移,迁移率为(75.67 ±4.51)%,是对照组[(33.00±7.00)%]的2.29倍(P<0.01);免疫细胞化学染色结果显示,对照组无Vimentin阳性表达,而予以TGF-β1诱导后,可见Vimentin阳性表达,胞质内出现棕黄色丝状排列结构;Western blot结果显示TGF-β1诱导48 h后,Vimentin蛋白表达明显上调,是对照组的6.86倍,E-cadherin蛋白表达明显下调,是对照组的5.70%.而予以SEMA3A预处理后,A549细胞基本保持原有的铺路石样状态,细胞迁移能力降低,Vimentin表达下调,E-cadherin表达上调.结论 SEMA3A能够通过上调E-cadherin蛋白的表达,抑制Vimentin蛋白的表达,显著抑制TGF-β1介导的A549细
作者:周海英;吴爱萍;董洪超;何珺;王宝杰;张逊
来源:中华实验外科杂志 2016 年 33卷 2期