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目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-195对人结肠癌细胞株LoVo的耐奥沙利铂(L-OHP)株LoVo/L-OHP对L-OHP耐药逆转的影响及其机制.方法 培养L-OHP细胞株LoVo/L-OHP,采用脂质体介导法分别转染miR-195模拟物、miR-195抑制物、miR-阴性对照,以未转染LoVo/L-OHP为空白对照,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测各组细胞中miR-195基因表达;噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞对L-OHP的半抑制率浓度(IC50值);Hoechst33258染色法检测各组细胞凋亡率;流式细胞术检测各组细胞周期变化;Western blot法检测各组细胞中P-糖蛋白(P-gp)、丝/苏氨酸蛋白激酶(Raf-1)和B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)蛋白表达.结果 miR-195模拟物组的IC50值为(61.7 ±12.8) μg/ml,miR-195抑制物组为(173.4±19.2) μg/ml,miR-阴性对照组为(117.6±16.9)μg/nl,空白对照组为(121.5±18.3)μg/ml,差异均有统计学意义(P<0.01).Hoechst 33258染色法检测结果显示,miR-195模拟物组的凋亡率为(7.1±1.3)%,miR-195抑制物组为(2.2±0.7)%,miR-阴性对照组为(4.5±1.0)%,空白对照组为(4.3±0.9)%,差异均有统计学意义(P<0.01).流式细胞术检测结果显示,miR-195模拟物组细胞G1期比例为(67.7±3.9)%和S期比例为(15.1±2.9)%,miR-195抑制物组分别为(37.4±4.8)%

作者:王鸽;周志红

来源:中华实验外科杂志 2016 年 33卷 4期

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作者:
王鸽;周志红
来源:
中华实验外科杂志 2016 年 33卷 4期
标签:
微小RNA-195 奥沙利铂 耐药逆转 机制 MicroRNA-195 Oxliplatin Resistance reversal Mechanism
目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-195对人结肠癌细胞株LoVo的耐奥沙利铂(L-OHP)株LoVo/L-OHP对L-OHP耐药逆转的影响及其机制.方法 培养L-OHP细胞株LoVo/L-OHP,采用脂质体介导法分别转染miR-195模拟物、miR-195抑制物、miR-阴性对照,以未转染LoVo/L-OHP为空白对照,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测各组细胞中miR-195基因表达;噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞对L-OHP的半抑制率浓度(IC50值);Hoechst33258染色法检测各组细胞凋亡率;流式细胞术检测各组细胞周期变化;Western blot法检测各组细胞中P-糖蛋白(P-gp)、丝/苏氨酸蛋白激酶(Raf-1)和B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)蛋白表达.结果 miR-195模拟物组的IC50值为(61.7 ±12.8) μg/ml,miR-195抑制物组为(173.4±19.2) μg/ml,miR-阴性对照组为(117.6±16.9)μg/nl,空白对照组为(121.5±18.3)μg/ml,差异均有统计学意义(P<0.01).Hoechst 33258染色法检测结果显示,miR-195模拟物组的凋亡率为(7.1±1.3)%,miR-195抑制物组为(2.2±0.7)%,miR-阴性对照组为(4.5±1.0)%,空白对照组为(4.3±0.9)%,差异均有统计学意义(P<0.01).流式细胞术检测结果显示,miR-195模拟物组细胞G1期比例为(67.7±3.9)%和S期比例为(15.1±2.9)%,miR-195抑制物组分别为(37.4±4.8)%