目的 检测Musashi-1在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达,观察RNA干扰(RNAi)靶向下调Musashi-1基因表达对人肺腺癌A549细胞生物学功能的影响.方法 应用免疫组织化学法检测54例NSCLC组织及配对癌旁组织Musashi-1蛋白表达水平,利用脂质体LipofectamineTM2000 RNAi Max将Musashi-1小干扰RNA(siRNA)转染至人肺腺癌细胞A549中,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot法分别检测Musashi-1 mRNA,β-连环蛋白(β-catenin)mRNA及其蛋白的表达;噻唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖;划痕实验及Transwell侵袭小室实验检测细胞的迁移和侵袭能力.结果54例NSCLC组织中,Musashi-1表达率为68.5%,而癌旁组织中的表达率仅为13.0%,差异有统计学意义(x2=34.51,P<0.05);siRNA干扰实验组Musashi-1 mRNA和β-catenin mRNA的表达量分别为9.51±2.04和11.38±3.02,明显低于阴性对照组的17.51±2.13和25.08±2.91和空白对照组的16.38±2.08和26.07±3.04(P<0.05).siRNA干扰实验组Musashi-1和β-catenin蛋白的灰度值分别为0.401±0.015和0.304±0.021,明显低于阴性对照组(0.742±0.011和0.825±0.023)和空白对照组(0.796±0.010和0.810±0.024,P<0.05).生长曲线显示Musashi-1 siRNA转染组细胞的增殖能力较阴性对照组及空白对照组
作者:段继惠;穆红;李彦敏;唐志琴
来源:中华实验外科杂志 2016 年 33卷 8期