目的 在人肝细胞癌(HCC)标本中检测癌和癌旁组织中长链非编码RNA(lncRNA)核富集转录体1(NEAT1)的表达差异,应用化学合成小干扰RNA (siRNA)抑制两组人肝癌细胞株(HepG2和SMMC-7721)NEAT1的转录,观察NEAT1转录降低后对HCC细胞的表达谱、侵袭和增殖功能的影响.方法 利用Trizol-氯仿提取HCC组织标本和癌旁组织(n=12),细胞株(HepG2、SMMC-772、HCC-LM3)中的总RNA,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测各组NEAT1表达差异[甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)作为内参],使用转染试剂Lipofectamine 2000和siRNANEAT1(终质量浓度100nmol/L)对HepG2和SMMC-7721细胞进行NEAT1敲低,RT-qPCR检测NEAT1敲低效果,并对NEAT1敲低组(NEAT1表达量＜对照组40％)和对照组细胞(n=2)进行表达谱测序,检测NEAT1敲低后对HCC细胞各肿瘤相关基因表达的影响,对NEAT1敲低组和对照组细胞进行羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)标记(终质量浓度5μmol/L)的细胞(2×105个/孔)增殖检测、细胞计数试剂盒(CCK-8)进行细胞增殖检测(10 μl/2 000个细胞)、Transwell细胞侵袭移动能力检测来探究NEAT1对HCC细胞(2×105个/孔)增殖和侵袭功能的影响.结果 NEAT1在HCC细胞和癌组织中表达量高于癌旁组织(P＜0.01),敲低HCC细胞株NEAT1表达导致很多参与肿瘤

作者：莽源祎；李立；冉江华；张升宁；刘静；李来邦；陈奕明；刘剑；高杨

来源：中华实验外科杂志 2016 年 33卷 10期