目的 观察微小RNA(miRNA,miR)-30a在肝纤维化中的表达及其对肝纤维化的影响.方法 通过C57BL/6小鼠胆管结扎(对照组10例,胆管结扎组15例)和10 ng/ml转化生长因子-β1(TGF-β1)处理肝星状细胞(LX-2和HSC-T6)分别构建体内和体外肝纤维化模型.通过转染miR-30a mimics和miR-30a agomir分别在肝星状细胞和小鼠体内过表达miR-30a.提取总RNA和全蛋白进行反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot实验检测miR-30a、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(collagen Ⅰ)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1).通过苏木素-伊红(HE)染色、胶原纤维染色(Masson染色)检测肝组织纤维化程度.结果 RT-PCR检测10例对照组和15例胆管结扎组小鼠肝脏miR-30a相对表达水平(2.037 ±0.256,n=10;1.007 ±0.126,n=15;P＜0.01).10 ng/ml TGF-β1处理肝星状细胞24h和48 hmiR-30a相对表达水平(LX-2:24 h,0.578±0.055,48 h,0.585±0.048;HSC-T6:24 h,0.698±0.055,48 h,0.610±0.033),明显低于对照组(LX-2:1.013±0.080;HSC-T6:1.001±0.013,P＜0.05),表明miR-30a在体内和体外诱导的肝纤维化模型中表达下降.通过miR-30a mimics转染肝星状细胞株诱导细胞内过表达miR-30a、α-SMA相对表达水平(LX-2:对照组1.024±0.106,miR-30a高表达组0.

作者：陈建亮；李书；刘雨亭；周澍；曹守纪；李国强

来源：中华实验外科杂志 2016 年 33卷 10期