目的 观察微小RNA(miRNA,miR)-425在胃癌组织和细胞株的表达,并探讨miR-425对胃癌BGC823细胞凋亡、自噬的影响.方法 采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测60例胃癌组织和癌旁组织miR-425表达,分析其与临床病理参数的关系,并检测miR-425在7种胃癌细胞株(HGC-27、BGC-803、MKN-45、MGC-823、SGC-7901、NCL-N87、AGS)及正常胃黏膜细胞GES-1的表达.选取miR-425表达水平最高的胃癌细胞瞬时转染miR-425 inhibitors.Real-time PCR检测miR-425 mRNA表达.流式细胞仪检测细胞周期、凋亡率及线粒体膜电位.Western blot检测凋亡、自噬相关蛋白表达.结果 胃癌组织miR-425相对表达水平为0.80 ±0.13,较癌旁组织(0.28±0.04)显著升高(P<0.05),且其表达与TNM分期、细胞分化程度、肿瘤浸润深度及有无淋巴结转移密切相关(P<0.05).BGC-803细胞中miR-425表达水平明显高于HGC-27、MKN-45、MGC-823、SGC-7901、NCL-N87、AGS及GES-1细胞(P<0.05).与对照组和空白转染组比较,转染miR-425 inhibitors能够明显诱导BGC-803细胞凋亡并出现G1期阻滞,同时线粒体膜电位明显降低(P<0.05);且B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、p62蛋白表达明显下调,B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-9、
作者:张卓奇;王志宇;郭剑;问明;史建伟;檀碧波;张爱民
来源:中华实验外科杂志 2016 年 33卷 12期