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目的:探讨芹菜素(API)是否诱导胃癌SGC-7901细胞发生自噬及其对细胞凋亡的影响.方法:采用不同浓度(0、20、40、60、80μmol/L)的API处理胃癌SGC-7901细胞24 h,MTT法检测API对细胞生长的抑制情况.分别采用不同浓度(0、20、40、60、80μmol/L)API处理细胞24 h,及60μmol/L的API处理不同时间(0、12、24、36、48 h),Western blot检测自噬标志蛋白微管相关蛋白l轻链3(LC3)、Beclin-1和磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/Akt/mTOR信号通路中关键分子p-Akt、p-mTOR的表达;电子显微镜下观察细胞自噬情况.细胞经自噬抑制剂氯喹(CQ)或3-甲基腺苷(3-MA)预处理后再加入API,Western blot检测聚二磷酸腺苷-核糖体聚合酶(PARP)的表达;流式细胞术流检测细胞凋亡率.结果:API对胃癌SGC-7901细胞生长具有明显抑制作用并呈剂量-效应关系.随着API浓度和作用时间的增加,SGC-7901细胞LC3Ⅱ与Beclin-1蛋白表达均增加,各剂量组与对照组相比较差异均具有统计学意义(P<0.05);API处理后的细胞逐渐出现自噬囊泡和自噬溶酶体;p-Akt、p-mTOR蛋白表达降低.采用自噬抑制剂抑制细胞自噬后,除API组LC3Ⅱ与Beclin-1蛋白表达明显高于对照组外(P<0.05),各组蛋白表达无显著差异.API+CQ组和API+3-MA组的PARP蛋白剪切片段表达及凋亡率均高于对照组和API组(P<

作者:孙悦;余洋;吴坤

来源:癌变·畸变·突变 2017 年 29卷 4期

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作者:
孙悦;余洋;吴坤
来源:
癌变·畸变·突变 2017 年 29卷 4期
标签:
芹菜素 胃癌 自噬 细胞凋亡 apigenin gastric cancer autophagy apoptosis
目的:探讨芹菜素(API)是否诱导胃癌SGC-7901细胞发生自噬及其对细胞凋亡的影响.方法:采用不同浓度(0、20、40、60、80μmol/L)的API处理胃癌SGC-7901细胞24 h,MTT法检测API对细胞生长的抑制情况.分别采用不同浓度(0、20、40、60、80μmol/L)API处理细胞24 h,及60μmol/L的API处理不同时间(0、12、24、36、48 h),Western blot检测自噬标志蛋白微管相关蛋白l轻链3(LC3)、Beclin-1和磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/Akt/mTOR信号通路中关键分子p-Akt、p-mTOR的表达;电子显微镜下观察细胞自噬情况.细胞经自噬抑制剂氯喹(CQ)或3-甲基腺苷(3-MA)预处理后再加入API,Western blot检测聚二磷酸腺苷-核糖体聚合酶(PARP)的表达;流式细胞术流检测细胞凋亡率.结果:API对胃癌SGC-7901细胞生长具有明显抑制作用并呈剂量-效应关系.随着API浓度和作用时间的增加,SGC-7901细胞LC3Ⅱ与Beclin-1蛋白表达均增加,各剂量组与对照组相比较差异均具有统计学意义(P<0.05);API处理后的细胞逐渐出现自噬囊泡和自噬溶酶体;p-Akt、p-mTOR蛋白表达降低.采用自噬抑制剂抑制细胞自噬后,除API组LC3Ⅱ与Beclin-1蛋白表达明显高于对照组外(P<0.05),各组蛋白表达无显著差异.API+CQ组和API+3-MA组的PARP蛋白剪切片段表达及凋亡率均高于对照组和API组(P<