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目的 探讨芹菜素对乳腺癌MCF-7细胞株增殖的影响及其机制.方法 常规培养MCF-7细胞,用噻唑蓝(MTT)法评价芹菜素(0、10、20、40、80 μmol/L)处理乳腺癌MCF-7细胞株24、48 h的增殖抑制率;DNA ladder检测芹菜素(0、10、20、40 μmol/L)处理24 h对MCF-7细胞株凋亡的影响;、丫啶橙(AO)染色观察芹菜素(0、10、20、40μmol/L)处理24 h后MCF-7细胞自噬泡的形态及数量,然后通过流式细胞术对细胞自噬率进行定量分析;Western blot法检测芹菜素(0、10、20、40 μmol/L)处理24 h后自噬相关蛋白LC3、蛋白激酶B(Akt)及其磷酸化水平的变化;Akt cDNA瞬时转染MCF-7细胞,使其过表达,流式细胞术检测细胞自噬率的变化.结果 MTT显示,芹菜素明显抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖,具有浓度依赖性及时间依赖性;DNA ladder并未显示出明显的阶梯状条带,提示芹菜素不能有效的诱导MCF-7细胞凋亡;AO染色显示芹菜素可诱导MCF-7细胞株自噬,且流式细胞术显示细胞自噬率具有浓度依赖性,芹菜素20、40 μmol/L组与对照组比较差异有统计学意义(P <0.01);Western blot显示,芹菜素可增加LC3Ⅱ的表达,同时降低Akt的磷酸化水平;自噬抑制剂3-甲基腺苷(3-MA)可使MCF-7的增殖抑制率降低,与对照组比较,差异有统计学意义(P <0.05);Akt cDNA瞬时转染

作者:刘博文;张斌;张伟然;赵洪猛;曹旭晨

来源:中华实验外科杂志 2013 年 30卷 9期

知识库介绍

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作者:
刘博文;张斌;张伟然;赵洪猛;曹旭晨
来源:
中华实验外科杂志 2013 年 30卷 9期
标签:
芹菜素 乳腺癌 自噬 Apigenin Breast cancer Autophagy
目的 探讨芹菜素对乳腺癌MCF-7细胞株增殖的影响及其机制.方法 常规培养MCF-7细胞,用噻唑蓝(MTT)法评价芹菜素(0、10、20、40、80 μmol/L)处理乳腺癌MCF-7细胞株24、48 h的增殖抑制率;DNA ladder检测芹菜素(0、10、20、40 μmol/L)处理24 h对MCF-7细胞株凋亡的影响;、丫啶橙(AO)染色观察芹菜素(0、10、20、40μmol/L)处理24 h后MCF-7细胞自噬泡的形态及数量,然后通过流式细胞术对细胞自噬率进行定量分析;Western blot法检测芹菜素(0、10、20、40 μmol/L)处理24 h后自噬相关蛋白LC3、蛋白激酶B(Akt)及其磷酸化水平的变化;Akt cDNA瞬时转染MCF-7细胞,使其过表达,流式细胞术检测细胞自噬率的变化.结果 MTT显示,芹菜素明显抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖,具有浓度依赖性及时间依赖性;DNA ladder并未显示出明显的阶梯状条带,提示芹菜素不能有效的诱导MCF-7细胞凋亡;AO染色显示芹菜素可诱导MCF-7细胞株自噬,且流式细胞术显示细胞自噬率具有浓度依赖性,芹菜素20、40 μmol/L组与对照组比较差异有统计学意义(P <0.01);Western blot显示,芹菜素可增加LC3Ⅱ的表达,同时降低Akt的磷酸化水平;自噬抑制剂3-甲基腺苷(3-MA)可使MCF-7的增殖抑制率降低,与对照组比较,差异有统计学意义(P <0.05);Akt cDNA瞬时转染