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目的:通过GATA2、GATA6探究环状RNA调控胃癌自噬和凋亡的机制。方法:以人胃癌SGC-7901细胞(中国科学院上海细胞生物学研究所)为研究对象,建立干扰RNA转染模型,通过流式细胞术检测细胞周期改变、膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)双染检测细胞凋亡、倒置相差显微镜、透射电镜观察细胞形态,并应用MDC染色对细胞自噬进行测定。结果:反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)以及蛋白质印迹法(Western blot)实验结果表明,胃癌细胞株GATA2与GATA6的mRNA与蛋白质的表达水平(0.84±0.18)、(0.87±0.13)、(0.85±0.19)、(0.87±0.11)均高于胃黏膜细胞的(0.21±0.03)、(0.23±0.05)、(0.19±0.01)、(0.18±0.06)。与人胃黏膜细胞GES1比较,胃癌细胞株中GATA2与GATA6表达水平均显著上调,表明GATA2与GATA6在胃癌中具有较高表达水平。对自噬相关蛋白的检测发现,GATA2、GATA6干扰后胃癌细胞自噬水平显著降低,分别为(0.87±0.03)、(0.84±0.05)( P<0.05),而透射电镜发现,GATA2、GATA6水平降低后,胃癌细胞中自噬小体随之减少。 结论:干扰GATA2/GATA6表达可以降低胃癌细胞自噬水平,促进细胞凋亡,从而影响胃癌细胞的增殖能力。

作者:唐思锋;王德友;赵伟

来源:中华实验外科杂志 2020 年 37卷 9期

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作者:
唐思锋;王德友;赵伟
来源:
中华实验外科杂志 2020 年 37卷 9期
标签:
胃癌 凋亡 自噬 GATA2/GATA6 Gastric cancer Apoptosis Autophagy GATA2/GATA6
目的:通过GATA2、GATA6探究环状RNA调控胃癌自噬和凋亡的机制。方法:以人胃癌SGC-7901细胞(中国科学院上海细胞生物学研究所)为研究对象,建立干扰RNA转染模型,通过流式细胞术检测细胞周期改变、膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)双染检测细胞凋亡、倒置相差显微镜、透射电镜观察细胞形态,并应用MDC染色对细胞自噬进行测定。结果:反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)以及蛋白质印迹法(Western blot)实验结果表明,胃癌细胞株GATA2与GATA6的mRNA与蛋白质的表达水平(0.84±0.18)、(0.87±0.13)、(0.85±0.19)、(0.87±0.11)均高于胃黏膜细胞的(0.21±0.03)、(0.23±0.05)、(0.19±0.01)、(0.18±0.06)。与人胃黏膜细胞GES1比较,胃癌细胞株中GATA2与GATA6表达水平均显著上调,表明GATA2与GATA6在胃癌中具有较高表达水平。对自噬相关蛋白的检测发现,GATA2、GATA6干扰后胃癌细胞自噬水平显著降低,分别为(0.87±0.03)、(0.84±0.05)( P<0.05),而透射电镜发现,GATA2、GATA6水平降低后,胃癌细胞中自噬小体随之减少。 结论:干扰GATA2/GATA6表达可以降低胃癌细胞自噬水平,促进细胞凋亡,从而影响胃癌细胞的增殖能力。