目的 观察慢病毒介导的RNA干扰沉默人高迁移率族蛋白A1(HMGA1)对肝癌细胞侵袭性的影响.方法 制备HMGA1小干扰RNA (siRNA)慢病毒载体,聚合酶链反应(PCR)筛选阳性克隆,基因测序鉴定;转染人肝癌细胞株HepG2后,Western blot检测其对细胞HMGA1基因表达的影响;噻唑蓝(MTT)实验和平板克隆实验检测HMGA1对人肝癌细胞株HepG2增殖和克隆形成的影响;划痕实验和Transwell侵袭实验检测HMGA1对人肝癌细胞株HepG2侵袭性的影响.结果 PCR和基因测序证实,成功构建HMGAl siRNA的慢病毒载体;Western blot证实转染后的人肝癌细胞株HepG2 HMGA1基因表达下调(P=0.018);MTT实验显示3组细胞生长抑制率为:阳性组(13.56±2.89)%、阴性组(0.00±2.28)%、空白对照组(0.00±1.85)%;克隆形成率分别为:阳性组(48.12±3.24)%、阴性组(75.25±6.23)%、空白对照组(73.45±4.32)%;划痕实验和Transwell侵袭实验显示转染后的人肝癌细胞株HepG2迁移力和侵袭力明显减低(P =0.021,P=0.014).结论 HMGA1 siRNA能特异性下调细胞HepG2中HMGA1的表达,降低了肝癌细胞的侵袭性..
作者:金志良;邓涛;陶圣祥;易长虹
来源:中华实验外科杂志 2017 年 34卷 2期