目的 探讨高糖水平对成纤维细胞的诱导衰老作用及其机制.方法 实验分对照组(葡萄糖浓度为5.56 mmol/L)和高糖组(葡萄糖浓度为33.33 mmol/L);采用β-半乳糖苷酶细胞衰老染色法检测细胞衰老;采用噻唑蓝(MTT)法测细胞增殖;实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测细胞衰老相关基因p16的mRNA表达变化;Western blot法检测p16基因的蛋白表达变化.结果 β-半乳糖苷酶细胞衰老染色结果显示,高糖组衰老细胞比例在第45天、第60天时明显高于对照组细胞[NIH3T3第45天:(14.402±6.527)％比(3.614±1.559)％,t=-3.595,P =0.019;NIH3T3第60天:(26.686±4.521)％比(3.750±1.742)％,t=-10.583,P=0.000;WI-38第45天:(44.116±12.386)％比(15.815 ±6.129)％,t=-4.579,P=0.002;WI-38第60天:(65.771±9.731)％比(22.081±5.706)％,t=-8.660,P=0.000];MTT法细胞增殖实验结果显示高糖组细胞增殖速率随时间增长明显低于对照组;RT-qPCR和Western blot法结果显示,高糖水平可以上调p16基因的表达.结论 高糖水平能够诱导成纤维细胞衰老,减缓其增殖,其机制可能与高糖水平导致p16基因高表达有关.
作者：耿梦龙；夏英鹏；杜文君；李辉南
来源：中华实验外科杂志 2017 年 34卷 11期
