目的 探讨敲低丙酮酸激酶M2亚型(PKM2)对肾癌细胞株ACHN迁移侵袭的影响及其机制.方法 构建靶向PKM2基因的pLV载体,筛选稳定转染的细胞株.采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测敲低PKM2对ACHN细胞增殖的影响.在Transwell小室的上室和下室之间不放置基质胶测定细胞的迁移能力,在Transwell小室的上室和下室之放置基质胶测定细胞的侵袭能力.通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blot的方法检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的变化.结果 CCK-8实验结果显示敲低PKM2抑制了ACHN的增殖.对照组的葡萄糖消耗率和乳酸生成率分别为(3.493 ±0.179)和(3.553±0.185) nmol/106 cells/min,而shPKM2组的葡萄糖消耗率和乳酸生成率分别为(1.457 ±0.081)和(5.820±0.352) nmol/106 cells/min(P =0.001,P=0.005).Transwell迁移实验结果显示shPKM2组和对照组到达下室的细胞数分别为(62±6)个和(39±5)个(P=0.001).Transwell侵袭实验结果显示shPKM2组和对照组到达下室的细胞数分别为(40±7)个和(26±6)个(P =0.009).通过Western blot和RT-qPCR检测shPKM2组中E-cadherin蛋白和mRNA的相对表达量分别为1.560±0.110和2.534±0.342,而对照组中E-cadherin蛋白和mRNA的相对表达量分别为0.833 ±0.070和1.312

作者：王新君；白培明；赵晓昆；罗广承

来源：中华实验外科杂志 2017 年 34卷 12期