目的 通过小干扰RNA (siRNA)抑制激肽释放酶10(KLK10)基因在结肠癌细胞中的表达,观察其对结肠癌细胞增殖和凋亡及顺铂(DDP)敏感性的影响.方法 实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测KLK10 mRNA在正常结肠细胞株NCM460和结肠癌细胞株HRT-S1、HCT116中的表达水平;利用Lipofectamine(R)RNAi MAX转染试剂将KLK10特异性siRNA转染进入结肠癌细胞株HRT-S1、HCT116;采用噻唑蓝(MTF)、流式细胞术(FCM)法检测siRNA干扰KLK10基因对HRT-S1、HCT116细胞增殖和凋亡的影响;使用Western blot法检测细胞周期蛋白(Cyclin) D1和B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)蛋白水平上的表达变化.结果 KLK10mRNA在结肠癌细胞株HRT-S1和HCT116中表达较正常结肠细胞明显升高(P =0.001);siRNA干扰KLK10基因后,KLK10mRNA表达水平在结肠癌细胞株HRT-S1和HCT116中明显降低(尸=0.002).siRNA干扰KLK10基因后,Cyclin D1蛋白表达水平在HCT1 16细胞株中明显降低(P=0.027),但在HRT-S1细胞株中差异无统计学意义(P =0.081);siRNA干扰KLK10基因后,bcl-2蛋白表达水平在HCT116和HRT-S1细胞株中均明显降低(P =0.038、0.016).siRNA抑制KLK10基因后,在HRT-S1和HCT116细胞株中,DDP的半数抑制浓度(IC50)值降低(P=0.032和0.022),结肠癌细胞的增殖被抑制;DDP+ siRN

作者：饶雪峰；陈东平；万平；陈晓亮；朱晓亮；曹虹

来源：中华实验外科杂志 2018 年 35卷 1期