目的 观察上调微小RNA-148a(miR-148a)表达对胰腺癌AsPC-1细胞抑癌基因前脑啡肽原(ppENK)、p16和Ras相关区域家族1A基因(RASSFlA)甲基化、蛋白表达及细胞增殖的影响.方法 利用LipofectamineTM2000转染miR-148a模拟物(miR-148a mimics)至胰腺癌AsPC-1细胞.实验细胞分为3组:空白对照组(转染脂质体)、阴性对照组(转染阴性对照序列)、实验组(转染miR-148a mimics).转染后72 h,采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测细胞中miR-148a表达水平;甲基化特异性聚合酶链反应(MsP)检测ppENK、p16和RASSF1A基因启动子甲基化;Western blot法检测DNA甲基转移酶1(DNMT1)及ppENK、p16和RASSF1A蛋白表达水平;噻唑蓝(MTT)法检测细胞体外增殖活力.结果 实验组miR-148a的表达量显著高于空白对照组及阴性对照组(4.63±1.32比1.00±0.30比0.93±0.37,P=0.002),而DNMT1蛋白表达量则显著降低(1.00±0.00比1.04±0.19比0.27±0.15,P=0.001).空白对照组和阴性对照组ppENK、p16和RASSF1A基因甲基化阳性,而实验组ppENK和p16基因甲基化阴性,RASSF1A基因部分甲基化.实验组ppENK、p16和RASSF1A蛋白表达量均显著高于两个对照组(ppENK:2.06±0.32比1.00±0.00比1.叭±0.21,P=0.002;p16:2.02±0.12比1.00±0.00比0.96±0.12,P=0.000;RA

作者：肖卫东；敖建；黄祯；彭龙；肖建；刘战赢；李勇

来源：中华实验外科杂志 2018 年 35卷 1期