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目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-24-3p对甲状腺乳头状癌(PTC)细胞增殖及迁移的调控作用.方法 应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)观察miR-24-3p在PTC中的表达.通过5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(EdU)实验、细胞计数试剂盒(CCK-8)、划痕实验和Transwell侵袭实验观察miR-24-3p在PTC中的作用.网站预测靶基因后,通过RT-PCR、Western blot及双荧光素酶报告实验,验证miR-24-3p的靶基因.结果 RT-PCR结果提示miR-24-3p在PTC组织中的表达量(0.28±0.02)明显低于癌旁组织(0.94 ±0.05,P=0.001),而其预测靶基因血小板源性生长因子受体B(PDGFRB)在PTC组织中呈高表达,在癌旁组织中无明显表达.在PTC细胞株TPCl中,转染miR-24-3p模拟物(mimic)的实验组细胞增殖为(EdU:19.3 ±2.5;CCK-8∶0.91 ±0.08)、划痕愈合面积为(23.6±3.5)%、侵袭细胞个数为(13.5±2.0)个,阴性对照组中细胞增殖为(EdU:38.0±2.6,P=0.006;CCK-8∶1.81 ±0.08,P=0.001)、划痕愈合面积为(42.6±2.5)%(P=0.020),侵袭细胞个数为(31.3±2.52)个(P =0.040),差异有统计学意义.Targetscan预测PDGFRB为miR-24-3p的靶基因.转染miR-24-3p mimic后PDGFRB蛋白的表达量(0.56 ±0.05)低于阴性对照组(1.19±0.12,P=0.020),但不影响PDGFRB mRNA的表达(27.34±1.37比27.57±

作者:朱晓峰;曾丽莉;赵洪远;曾峰;胡康;李涛浪;程晓明

来源:中华实验外科杂志 2018 年 35卷 3期

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作者:
朱晓峰;曾丽莉;赵洪远;曾峰;胡康;李涛浪;程晓明
来源:
中华实验外科杂志 2018 年 35卷 3期
标签:
甲状腺乳头状癌 微小RNA 血小板源性生长因子受体B 微小RNA-24-3p Papillary thyroid carcinoma MicroRNA Platelet derived growth factor receptor B MicroRNA-24-3p
目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-24-3p对甲状腺乳头状癌(PTC)细胞增殖及迁移的调控作用.方法 应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)观察miR-24-3p在PTC中的表达.通过5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(EdU)实验、细胞计数试剂盒(CCK-8)、划痕实验和Transwell侵袭实验观察miR-24-3p在PTC中的作用.网站预测靶基因后,通过RT-PCR、Western blot及双荧光素酶报告实验,验证miR-24-3p的靶基因.结果 RT-PCR结果提示miR-24-3p在PTC组织中的表达量(0.28±0.02)明显低于癌旁组织(0.94 ±0.05,P=0.001),而其预测靶基因血小板源性生长因子受体B(PDGFRB)在PTC组织中呈高表达,在癌旁组织中无明显表达.在PTC细胞株TPCl中,转染miR-24-3p模拟物(mimic)的实验组细胞增殖为(EdU:19.3 ±2.5;CCK-8∶0.91 ±0.08)、划痕愈合面积为(23.6±3.5)%、侵袭细胞个数为(13.5±2.0)个,阴性对照组中细胞增殖为(EdU:38.0±2.6,P=0.006;CCK-8∶1.81 ±0.08,P=0.001)、划痕愈合面积为(42.6±2.5)%(P=0.020),侵袭细胞个数为(31.3±2.52)个(P =0.040),差异有统计学意义.Targetscan预测PDGFRB为miR-24-3p的靶基因.转染miR-24-3p mimic后PDGFRB蛋白的表达量(0.56 ±0.05)低于阴性对照组(1.19±0.12,P=0.020),但不影响PDGFRB mRNA的表达(27.34±1.37比27.57±