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目的 观察食管鳞癌细胞株中Krüppel样因子4(KLF4)启动子区甲基化水平对其表达及对顺铂耐药性的影响.方法 采用甲基化特异性聚合酶链反应(PCR)及反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测7种食管鳞癌细胞株中KLF4甲基化及表达水平,筛选KLF4高甲基化及低甲基化水平细胞株(TE1及KYSE140).不同顺铂浓度下,使用噻唑蓝(MTT)法检测不同细胞株的增殖活性,使用流式细胞仪检测不同细胞株细胞凋亡及细胞周期.结果 细胞株CAES17、EC109、KYSE140、KYSE70和KYSE30中KLF4相对高表达,其启动子区呈低甲基化,细胞株TE1和KYSE510中KLF4相对低表达,其启动子区高甲基化.使用5-Aza-CdR去除其甲基化可恢复TE1细胞株KLF4表达.MTT法示,在顺铂终质量浓度为0.5、1.0、5.0、10.0 mg/L时,使用5-Aza-CdR处理TE1后细胞抑制率均增加(t =5.053,P=0.007;t=3.792,P=0.019;t=5.119,P=0.007;t=7.213,P=0.002),KYSE140细胞抑制率高于TE1(t=6.156,P=0.004;t=5.463,P=0.005;t=10.211,P=0.001;t=13.278,P=0.000).流式细胞仪检测示,顺铂终质量浓度为1.0 mg/L时,使用5-Aza-CdR处理TE1前后差异无统计学意义[(6.2±0.9)%比(7.0±0.7)%,P=0.290],TE1细胞株凋亡率低于KYSE140细胞株凋亡率[(6.2±0.9)%比(9.1±1.5)%,P=0.045].顺铂终质量浓度5.0 mg/L及10.0

作者:马钊;于振涛;刘肖琼;张洪典;陈传贵

来源:中华实验外科杂志 2018 年 35卷 3期

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作者:
马钊;于振涛;刘肖琼;张洪典;陈传贵
来源:
中华实验外科杂志 2018 年 35卷 3期
标签:
癌,鳞状细胞 顺铂 甲基化 药物敏感性 Carcinoma,Suamous cell Cisplatin Drug sensitivity Methylation
目的 观察食管鳞癌细胞株中Krüppel样因子4(KLF4)启动子区甲基化水平对其表达及对顺铂耐药性的影响.方法 采用甲基化特异性聚合酶链反应(PCR)及反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测7种食管鳞癌细胞株中KLF4甲基化及表达水平,筛选KLF4高甲基化及低甲基化水平细胞株(TE1及KYSE140).不同顺铂浓度下,使用噻唑蓝(MTT)法检测不同细胞株的增殖活性,使用流式细胞仪检测不同细胞株细胞凋亡及细胞周期.结果 细胞株CAES17、EC109、KYSE140、KYSE70和KYSE30中KLF4相对高表达,其启动子区呈低甲基化,细胞株TE1和KYSE510中KLF4相对低表达,其启动子区高甲基化.使用5-Aza-CdR去除其甲基化可恢复TE1细胞株KLF4表达.MTT法示,在顺铂终质量浓度为0.5、1.0、5.0、10.0 mg/L时,使用5-Aza-CdR处理TE1后细胞抑制率均增加(t =5.053,P=0.007;t=3.792,P=0.019;t=5.119,P=0.007;t=7.213,P=0.002),KYSE140细胞抑制率高于TE1(t=6.156,P=0.004;t=5.463,P=0.005;t=10.211,P=0.001;t=13.278,P=0.000).流式细胞仪检测示,顺铂终质量浓度为1.0 mg/L时,使用5-Aza-CdR处理TE1前后差异无统计学意义[(6.2±0.9)%比(7.0±0.7)%,P=0.290],TE1细胞株凋亡率低于KYSE140细胞株凋亡率[(6.2±0.9)%比(9.1±1.5)%,P=0.045].顺铂终质量浓度5.0 mg/L及10.0