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目的 观察敲低ABCB5基因对食管癌化疗敏感性的影响.方法 构建ABCB5短发卡RNA(shRNA)慢病毒载体,包装空病毒和ABCB5 shRNA慢病毒,感染食管癌EC109细胞,筛选出空载细胞株(对照组)和ABCB5 shRNA细胞株(ABCB5 KD1组和ABCB5 KD2组).采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测两株敲低稳定细胞株基因沉默效果;采用Western blot法检测ABCB5蛋白表达;采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞的对化疗药物顺铂的敏感性;建立裸鼠食管癌模型,检测敲低ABCB5基因前后EC109细胞体内成瘤能力及顺铂对移植肿瘤的抑制作用.结果 与对照组比较,ABCB5 KD1组和ABCB5 KD2组食管癌细胞ABCB5 mRNA水平显著下调,差异有统计学意义(t=2.945,P=0.000;t=3.198,P=0.000).与对照组ABCB5蛋白水平比较,ABCB5 KD1组和ABCB5 KD2组食管癌细胞ABCB5 mRNA水平显著下调,差异有统计学意义(t=3.091,P=0.000;t=3.598,P=0.000).与对照组细胞比较,顺铂对食管癌细胞ABCB5敲低稳定细胞株具有较高的杀伤性,差异有统计学意义(F=3.124,P=0.010;F=3.593,P=0.009).ABCB5基因敲低食管癌细胞移植后肿瘤生长缓慢,且应用顺铂治疗后,对肿瘤的抑制作用更加显著.结论 敲低ABCB5基因能够特异性沉默ABCB5 mRNA和蛋白水平的表达,显著增强食管癌对顺铂的敏感性.

作者:郑天亮;何占锋;赵松

来源:中华实验外科杂志 2018 年 35卷 5期

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作者:
郑天亮;何占锋;赵松
来源:
中华实验外科杂志 2018 年 35卷 5期
标签:
食管癌 ABCB5基因 顺铂 化疗敏感性 Esophageal carcinoma ABCB5 gene Cisplatin Chemotherapy sensitivity
目的 观察敲低ABCB5基因对食管癌化疗敏感性的影响.方法 构建ABCB5短发卡RNA(shRNA)慢病毒载体,包装空病毒和ABCB5 shRNA慢病毒,感染食管癌EC109细胞,筛选出空载细胞株(对照组)和ABCB5 shRNA细胞株(ABCB5 KD1组和ABCB5 KD2组).采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测两株敲低稳定细胞株基因沉默效果;采用Western blot法检测ABCB5蛋白表达;采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞的对化疗药物顺铂的敏感性;建立裸鼠食管癌模型,检测敲低ABCB5基因前后EC109细胞体内成瘤能力及顺铂对移植肿瘤的抑制作用.结果 与对照组比较,ABCB5 KD1组和ABCB5 KD2组食管癌细胞ABCB5 mRNA水平显著下调,差异有统计学意义(t=2.945,P=0.000;t=3.198,P=0.000).与对照组ABCB5蛋白水平比较,ABCB5 KD1组和ABCB5 KD2组食管癌细胞ABCB5 mRNA水平显著下调,差异有统计学意义(t=3.091,P=0.000;t=3.598,P=0.000).与对照组细胞比较,顺铂对食管癌细胞ABCB5敲低稳定细胞株具有较高的杀伤性,差异有统计学意义(F=3.124,P=0.010;F=3.593,P=0.009).ABCB5基因敲低食管癌细胞移植后肿瘤生长缓慢,且应用顺铂治疗后,对肿瘤的抑制作用更加显著.结论 敲低ABCB5基因能够特异性沉默ABCB5 mRNA和蛋白水平的表达,显著增强食管癌对顺铂的敏感性.