目的 比较3种富集结肠癌HCT116细胞肿瘤干细胞(CSC)培养方案的效率.方法 含不同浓度生长因子的杜尔伯科改良伊格尔(DMEM)/F12无血清培养基(分为G1、G2、G3组)悬浮培养HCT116细胞14d获得细胞球,其中G1组方案:10 ng/ml上皮生长因子(EGF)+ 10 ng/ml成纤维细胞生长因子(bFGF);G2组:20 ng/ml EGF+ 10 ng/ml bFGF;G3组:20 ng/ml EGF+ 20 ng/mlbFGF.流式细胞术(FCM)检测细胞球中CD133+ CD44+、CD133+、CD44+比例变化及细胞周期变化;实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测细胞球中CSC基因(CD133、CD44、CD166、CD66c)mRNA表达变化;Sphere-forming assay检测细胞球自我更新能力变化;平板克隆形成实验检测细胞体外成瘤能力变化;CC K-8检测细胞增殖能力变化.结果 FCM检测3组细胞中CD133+细胞比例分别为0.167±0.025、0.233±0.031和0.030±0.010,差异有统计学意义(F=58.020,P=0.000);3组细胞中CD133+ CD44细胞比例分别为0.033±0.006、0.097 ±0.031和0.023±0.006,差异有统计学意义(F=14.233,P=0.005);FCM检测细胞周期结果:3组细胞Go/G1期比例分别为52.533±0.929,66.893±1.057和57.377±1.256,差异有统计学意义(F=134.945,P=0.000);3组细胞S期比例分别为35.770±0.799、32.443±1.110和34.463±0.396,差异有统

作者：李伟男；李勇；李利发；周何；杨刚；钟晓蓉；冷政伟；李敬东

来源：中华实验外科杂志 2018 年 35卷 8期