目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-452对胃癌细胞上皮-间充质转化(EMT)的影响及分子机制.方法 收集我院经手术切除的胃癌组织和癌旁组织作为研究对象,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析miR-452 mRNA表达水平;培养胃癌细胞SGC-7901,通过转染miR-452模型物miR-452(miR-452组),采用Transwell分析细胞的EMT;采用生物信息学软件和双荧光素酶报告基因分析miR-452的靶基因变化;采用蛋白质印迹法(Western blot)分析EMT相关的标志物水平以及miR-452介导的信号通路.结果 与癌旁组织(1.10 ±0.20)比较,胃癌组织中miR-452 mRNA表达水平(3.07±0.31)显著增加,差异有统计学意义(t =3.912,P<0.05).与对照组细胞(75.19±9.11)比较,miR-452组细胞迁移能力(171.34 ±14.56)显著增加,差异均有统计学意义(t=3.109,P<0.05).miR-452组细胞侵袭数量生物信息学和双荧光素酶报告基因显示糖原合成酶激酶3β(GSK3β)是miR-452的靶基因.与对照组细胞[(1.12±0.18)、(1.10±0.22)]比较,miR-452组细胞GSK3β表达水平(0.22±0.10)和磷酸化β-连环蛋白(p-β-catenin)蛋白水平(0.25±0.10)显著下调,差异有统计学意义(t=4.011、3.994,P<0.05).与对照组细胞[(0.51±0.10)、(0.22±0.09)、(0.19±0.10)]比较,miR-452组细胞EMT标志物E-钙黏蛋白
作者:李东亮;李志猛
来源:中华实验外科杂志 2019 年 36卷 9期