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目的:观察神经干细胞(NSCs)联合神经营养因子-3(NT-3)基因修饰嗅鞘细胞(OECs)移植对颅脑损伤(TBI)大鼠神经修复的作用。方法:取新生乳鼠海马和嗅球原代培养NSCs及OECs并鉴定。用含NT-3基因的慢病毒载体转染OECs,构建NT-3基因修饰OECs(OECs-NT-3)。取50只体重(200±20) g SD成年雄性大鼠(山西医科大学实验动物中心)随机分为假手术组、模型组、OECs-NT-3移植组、NSCs移植组、OECs-NT-3联合NSCs移植组,分组后制作大鼠颅脑损伤模型,给予相应细胞移植处理。细胞移植后1、7、14、28 d行改良神经功能评分(mNSS),并各时间点取脑组织,制备石蜡切片行苏木精-伊红(HE)染色,原位缺口末端标记法(TUNEL)检测,溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)、p75免疫组织化学染色。结果:大鼠mNSS评分:移植28 d,联合组[(4.00±1.05)分]与模型组[(8.50±1.43)分]、OECs-NT-3组[(5.50±1.35)分]、NSCs组[(6.00±1.49)分]比较,差异有统计学意义( t=-7.997、-2.764、-3.464, P<0.05),而OECs-NT-3组与NSCs组比较,差异无统计学意义( t=-0.785, P>0.05)。HE染色示假手术组、模型组、OECs-NT-3组、NSCs组、联合组损伤灶细胞密度依次为(220±22)、(299±47)、(347±35)、(390±72)、(523±55)个/每高倍镜视

作者:闫耀宗;金保哲;张新中;李海明;周文科;张岱男

来源:中华实验外科杂志 2020 年 37卷 1期

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作者:
闫耀宗;金保哲;张新中;李海明;周文科;张岱男
来源:
中华实验外科杂志 2020 年 37卷 1期
标签:
神经干细胞 神经营养因子-3基因 基因修饰 嗅鞘细胞 联合移植 颅脑损伤 Neural stem cell Neurotrophin-3 gene Gene modify Olfactory ensheathing cells Combined transplantation Traumatic brain injury
目的:观察神经干细胞(NSCs)联合神经营养因子-3(NT-3)基因修饰嗅鞘细胞(OECs)移植对颅脑损伤(TBI)大鼠神经修复的作用。方法:取新生乳鼠海马和嗅球原代培养NSCs及OECs并鉴定。用含NT-3基因的慢病毒载体转染OECs,构建NT-3基因修饰OECs(OECs-NT-3)。取50只体重(200±20) g SD成年雄性大鼠(山西医科大学实验动物中心)随机分为假手术组、模型组、OECs-NT-3移植组、NSCs移植组、OECs-NT-3联合NSCs移植组,分组后制作大鼠颅脑损伤模型,给予相应细胞移植处理。细胞移植后1、7、14、28 d行改良神经功能评分(mNSS),并各时间点取脑组织,制备石蜡切片行苏木精-伊红(HE)染色,原位缺口末端标记法(TUNEL)检测,溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)、p75免疫组织化学染色。结果:大鼠mNSS评分:移植28 d,联合组[(4.00±1.05)分]与模型组[(8.50±1.43)分]、OECs-NT-3组[(5.50±1.35)分]、NSCs组[(6.00±1.49)分]比较,差异有统计学意义( t=-7.997、-2.764、-3.464, P<0.05),而OECs-NT-3组与NSCs组比较,差异无统计学意义( t=-0.785, P>0.05)。HE染色示假手术组、模型组、OECs-NT-3组、NSCs组、联合组损伤灶细胞密度依次为(220±22)、(299±47)、(347±35)、(390±72)、(523±55)个/每高倍镜视