目的:构建靶向血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)可调控活性的小分子门控嵌合抗原受体T(smgCAR-T)细胞系统并在体外验证其抗肿瘤和可调节活性。方法:采用基因全长合成和磷酸钙转染法构建smgCAR-T及其阳性(CAR
＋-T)和阴性(CAR
--T)对照细胞。同时构建表达VEGFR2的小鼠结直肠癌细胞(MCA38
VEGFR2＋)。验证并筛选构建成功的细胞后再体外验证CAR-T细胞靶向结合能力。在不同的效靶比下检测白细胞介素-2和肿瘤坏死因子-γ的浓度来评估CAR-T细胞的体外分泌功能，用乳酸脱氢酶浓度评估CAR-T细胞的体外抗肿瘤活性。组间的比较采用
t检验或单因素方差分析。
结果:基因测序和流式细胞术证实CAR-T细胞和靶细胞构建成功。与对照组比较，CAR
＋-T细胞＋MCA38
VEGFR2＋组具有最强的靶细胞杀伤能力。在smgCAR-T细胞＋MCA38
VEGFR2＋组中，随着C16-(S)-3-甲基吲哚雷帕霉素(Rapalog)滴度升高靶细胞杀伤率逐渐升高；当Rapalog为40 nmol/L时杀伤率达到最大值，为(66.25±13.20)
作者：杨超；郑勇斌；童仕伦；何小波；曹峰瑜；黄朔阳；黎华丽；程煌荣
来源：中华实验外科杂志 2021 年 38卷 2期
