目的:探讨长非编码RNA TUSC7(TUSC7)对调控结直肠癌多药耐药细胞株LOVO/奥沙利铂(L-OHP)细胞的影响及分子机制。方法:采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测TUSC7、miR-10a在结直肠癌多药耐药细胞株LOVO/L-OHP、亲本细胞株LOVO中的表达。利用脂质体Lipofectamine? 2000将pcDNA-TUSC7质粒和(或)miR-10a mimic转染LOVO/L-OHP细胞,构建过表达TUSC7和(或)miR-10a细胞。Real-time PCR检测转染后LOVO细胞中TUSC7、miR-10a表达量。Real-time PCR、蛋白质印迹法(Western blot)、噻唑蓝(MTT)、Transwell小室实验、细胞划痕实验检测过表达TUSC7对LOVO/L-OHP细胞miR-10a及其下游靶基因第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)、EphA8蛋白表达、增殖能力、侵袭能力、迁移能力及化疗敏感性的影响。应用SPSS 13.0软件对结果进行统计分析。结果:LOVO/L-OHP细胞中TUSC7表达水平(0.238±0.048)显著低于LOVO细胞(0.628±0.041,
t=10.103,
P<0.01),miR-10a表达水平(4.758±0.275)显著高于LOVO细胞(2.258±0.327,
t=-34.179,
P<0.01)。转染后TUSC7组TUSC7及PTEN、EphA8蛋白表达水平(9.358±1.348、4.252±0.213、5.002±0.313)显著高于对照组(0.206±0.037、0.588±0.1
作者:任维聃;刘桂伟;冶浩鹏;姜辉;郭庆金;耿学辰;姜国胜
来源:中华实验外科杂志 2021 年 38卷 8期