目的:探讨氧化苦参碱(Oxy)对结肠癌细胞的增殖、侵袭及迁移能力的影响及机制。方法:对结肠癌HIC/S和人结肠癌细胞(LOVO细胞)系进行复苏,以3×10
5/孔的密度进行培养,用浓度为0、3.0、6.0、12.0 μmol/L的2 ml Oxy处理,在处理后24、48、72 h,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测各组细胞的增殖率,用相位差显微镜观察各组细胞处理后24 h的形态变化;经0、3.0、6.0、12.0 μmol/L的2 ml Oxy处理LOVO细胞系48 h后,Transwell法分析各组细胞系的迁移和侵袭能力,采用原位缺口末端标记法(TUNEL)法和免疫荧光法检测各组细胞中TUNEL阳性细胞数和裂解的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)的表达,采用蛋白质免疫印迹和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组细胞系中血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)的蛋白水平和mRNA水平。
结果:Oxy处理24、48、72 h以后,结肠癌细胞LOVO和HIC/S的活力随着Oxy浓度的升高而下降(
F=4.983,
P<0.01),各时间点均在Oxy浓度为12.0 μmol/L时活力抑制最显著(
F=4.074,
P<0.05),且经过浓度为6.0 μmol/L的Oxy处理24 h以后,
作者:李志;冷羽;赖象权;张廷;邓发;张芳
来源:中华实验外科杂志 2021 年 38卷 10期