目的 探讨1,4,5-三磷酸肌醇3激酶A(ITPKA)在脑胶质瘤细胞的表达和功能.方法 利用实时定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)比较SVGP12、U118和U87细胞系(购自中国科学院生物化学与细胞生物学研究所)ITPKA mRNA和蛋白表达水平.将U87细胞分为对照组、对照短发卡RNA(shRNA)组和sh-ITPKA组,噻唑蓝法检测转染细胞培养24、48、72、96 h后细胞活性,平板克隆和小室迁移(Transwell)法检测克隆形成能力与细胞迁移能力,Western blot检测ITPKA、波形蛋白、N-钙黏蛋白和E-钙黏蛋白表达水平.多组间比较采用单因素方差分析或双因素方差分析.结果 U118和U87细胞中ITPKA mRNA和蛋白表达水平明显高于SVGP12细胞(mRNA 水平:2.81±0.40、3.92±0.19 比 1.06±0.06,F=94.48,P＜0.01;蛋白水平:0.57±0.05、0.66±0.03 比 0.20±0.01,F=161.30,P＜0.01).培养 24、48、72、96 h 后,sh-ITPKA 组细胞活性明显低于对照组和对照 shRNA 组(24 h:0.14±0.01 比 0.19±0.01、0.20±0.02,P＜0.01;48 h:0.20±0.01 比 0.30±0.01、0.30±0.02,P＜0.01;72 h:0.26±0.01 比 0.37±0.01、0.38±0.01,P＜0.01;96h:0.29±0.01 比 0.45±0.01、0.45±0.01,F交互=17.22,F 时间=713.00,F 分组=662.60,P＜0.01)o sh-ITPKA组细胞细胞迁

作者：陈鑫璞；季玉陈；白亚辉；刘建新；王凯；刘献志

来源：中华实验外科杂志 2022 年 39卷 11期