目的：构建含有E-钙黏蛋白（cadherin）基因和N-钙黏蛋白基因启动子的荧光素酶报告基因载体，并检测E-钙黏蛋白启动子和N-钙黏蛋白启动子的活性。方法利用PCR技术从乳腺癌细胞ZR75-1基因组中扩增出E-钙黏蛋白和N-钙黏蛋白启动子片段，插入到荧光素酶报告基因载体pGL4-basic中，确定所扩增的DNA序列后，将其转染至乳腺癌细胞ZR75-1和肝癌细胞HepG2中，检测启动子的活性。结果测序结果表明，扩增的E-钙黏蛋白启动子序列正确；荧光素酶活性实验表明，E-钙黏蛋白启动子和N-钙黏蛋白启动子在乳腺癌细胞ZR75-1和肝癌细胞HepG2中表达都具有活性。结论成功构建了E-钙黏蛋白启动子和N-钙黏蛋白启动子报告基因表达载体，为进一步筛选调节E-钙黏蛋白和N-钙黏蛋白表达的转录因子提供了重要基础。
作者：周蕾；张亚楠；刘婕；丁丽华；叶棋浓
来源：军事医学 2014 年 11期
