目的研究富含半胱氨酸酸性分泌糖蛋白(SPARC)的全长蛋白及其2.1肽段对人肾小球系膜细胞(HMC)增殖、凋亡及细胞周期的影响,初步探讨SPARC全长蛋白及其肽段对HMC作用的可能机制.方法采用体外传代培养的HMC,用不同浓度的SPARC全长蛋白及其肽段分别作用不同时间.采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡;应用Western印迹检测SPARC全长蛋白及肽段对HMC细胞周期调控蛋白cyclinD1、p21Wafl表达的影响.结果(1)与对照组比较,不同浓度(12.5、25、50μg/ml)SPARC全长蛋白及其肽段作用48 h都能明显抑制HMC的增殖,并呈剂量和时间依赖性,96 h达到高峰.(2)12.5 μg/mlSPARC全长蛋白及其肽段作用96 h,能明显影响细胞周期,使G0/G1期细胞增加,S期细胞减少,可使HMC的细胞周期阻滞在G0/G1期.(3)SPARC全长蛋白及其肽段可在体外诱导HMC细胞凋亡.(4)cyclinD1的表达明显减弱、而p21Wafl的表达明显增强.结论SPARC全长蛋白及其肽段可剂量依赖性地抑制HMC的增殖,其作用可能通过抑制cyclinD1的表达、上调p21Wafl的表达,使细胞周期阻滞在G0/G1期.这为临床治疗原发性、继发性系膜增生性肾小球肾炎提供了线索.
作者：邬碧波；张黎明；付莉莉；王文靖；梅长林
来源：中华肾脏病杂志 2006 年 22卷 4期
