目的 观察骨架调节蛋白CIP4(Cdc42 interacting protein 4)对转化生长因子β1 (TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞-间充质转分化(EMT)的影响,并探讨其产生的机制.方法 10 μg/TGF-β1刺激72 h诱导人近端肾小管上皮细胞(HK-2细胞)向间充质转分化.Western 印迹法检测各组细胞内E-cadherin和α-SMA蛋白的表达.倒置显微镜观察细胞形态的变化.根据GenBank人CIP4的完全cDNA序列,设计1条特异性干扰CIP4表达的RNA片段(CIP4-siRNA)和含野生型CIP4的重组真核表达质粒(pcDNA3.1-hCIP4),利用lipofactamine 2000将其转染HK-2细胞.Western 印迹法检测埘照组、TGF-β1刺激组、CIP4-siRNA转染组、pcDNA3.1-CIP4转染组细胞内CIP4、E-cadherin和α-SMA蛋白的表达,共聚焦显微镜观察E-cadherin和α-SMA蛋白的分布改变;用PI3K-Akt特异性抑制剂渥曼青霉素(wortmannin)1μmol/L干预TGF-β1刺激的HK-2细胞48 h,Western印迹法检测对照组和干预组CIP4表达的变化.结果 TGF-β1干预后HK-2细胞E-cadherin蛋白表达显著减少(P＜0.05),α-SMA 蛋白表达显著增多(P＜0.05),细胞形态由典型的上皮细胞向肌成纤维细胞转变,表明TGF-β1诱导肾小管上皮细胞EMT模型成功.CIP4-siRNA抑制TGF-β1诱导的HK-2细胞表达CIP4后,E-cadherin蛋白表达显著增多(P

作者：白寿军；张亚敏；曾锐；许楚瓯；刘丽丽；周巧丹；李彩霞；裴广畅；葛树旺；徐钢；刘晓城

来源：中华肾脏病杂志 2011 年 27卷 4期