目的 探讨乙型肝炎病毒X基因(HBX)转染人近端肾小管上皮细胞(HK-2)后对其凋亡及免疫指标的影响.方法 体外培养HK-2.用分子克隆的方法构建pcDNA3.1-myc-HBX质粒,采用脂质体转染法瞬时转染HK-2细胞.实时定量PCR和Western印迹法检测细胞中Toll样受体4(TLR4)的变化,流式细胞术检测细胞凋亡情况及细胞表面人组织相容复合物(MHC)-Ⅱ、CD40的变化;ELISA法检测细胞培养上清中IL-4、IFN-γ水平.结果 与对照组相比,转染pcDNA3.1-myc-HBX质粒组凋亡细胞数量显著增多(P< 0.05);TLR4的表达及其表面MHC-Ⅱ、CD40表达均显著上调(均P<0.05);其上清液中IFN-γ水平增加(P<0.05),但IL-4水平降低(P<0.05).结论 HBX质粒转染HK-2细胞后可引起细胞凋亡增加,促进细胞表面免疫分子的表达,最终导致细胞损伤及免疫微环境紊乱.
作者:王轩;周益;袁伟杰;朱楠
来源:中华肾脏病杂志 2013 年 29卷 1期