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目的 探讨乙型肝炎病毒X基因(HBX)转染人近端肾小管上皮细胞(HK-2)后对其凋亡及免疫指标的影响.方法 体外培养HK-2.用分子克隆的方法构建pcDNA3.1-myc-HBX质粒,采用脂质体转染法瞬时转染HK-2细胞.实时定量PCR和Western印迹法检测细胞中Toll样受体4(TLR4)的变化,流式细胞术检测细胞凋亡情况及细胞表面人组织相容复合物(MHC)-Ⅱ、CD40的变化;ELISA法检测细胞培养上清中IL-4、IFN-γ水平.结果 与对照组相比,转染pcDNA3.1-myc-HBX质粒组凋亡细胞数量显著增多(P< 0.05);TLR4的表达及其表面MHC-Ⅱ、CD40表达均显著上调(均P<0.05);其上清液中IFN-γ水平增加(P<0.05),但IL-4水平降低(P<0.05).结论 HBX质粒转染HK-2细胞后可引起细胞凋亡增加,促进细胞表面免疫分子的表达,最终导致细胞损伤及免疫微环境紊乱.

作者:王轩;周益;袁伟杰;朱楠

来源:中华肾脏病杂志 2013 年 29卷 1期

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作者:
王轩;周益;袁伟杰;朱楠
来源:
中华肾脏病杂志 2013 年 29卷 1期
标签:
转染 肝炎病毒,乙型 细胞凋亡 肾小管上皮细胞 Toll样受体4 免疫分子 Transfection Hepatitis B virus Apoptosis Renal tubular epithelial cells Toll-like receptor 4 Immune molecules
目的 探讨乙型肝炎病毒X基因(HBX)转染人近端肾小管上皮细胞(HK-2)后对其凋亡及免疫指标的影响.方法 体外培养HK-2.用分子克隆的方法构建pcDNA3.1-myc-HBX质粒,采用脂质体转染法瞬时转染HK-2细胞.实时定量PCR和Western印迹法检测细胞中Toll样受体4(TLR4)的变化,流式细胞术检测细胞凋亡情况及细胞表面人组织相容复合物(MHC)-Ⅱ、CD40的变化;ELISA法检测细胞培养上清中IL-4、IFN-γ水平.结果 与对照组相比,转染pcDNA3.1-myc-HBX质粒组凋亡细胞数量显著增多(P< 0.05);TLR4的表达及其表面MHC-Ⅱ、CD40表达均显著上调(均P<0.05);其上清液中IFN-γ水平增加(P<0.05),但IL-4水平降低(P<0.05).结论 HBX质粒转染HK-2细胞后可引起细胞凋亡增加,促进细胞表面免疫分子的表达,最终导致细胞损伤及免疫微环境紊乱.